[发明专利]一种动物角膜组织的去细胞方法

权利要求书

1.一种动物角膜组织的去细胞方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

步骤一、将摘取的动物角膜组织清洗干净后置于高静压处理设备中，进行高静压处理，使动物角膜组织中全部细胞破碎；

步骤二、将经过步骤一处理后的角膜组织置于清洗液中进行震荡清洗，去除具有免疫原性的细胞成分及可溶性蛋白成分。

2.按照权利要求1所述的一种动物角膜组织的去细胞方法，其特征在于：步骤一中进行高静压处理的压力为100Mpa～1000Mpa。

3.按照权利要求1所述的一种动物角膜组织的去细胞方法，其特征在于：步骤一中进行高静压处理的压力保持时间为1min～20min。

4.按照权利要求1所述的一种动物角膜组织的去细胞方法，其特征在于：步骤一中进行高静压处理时的处理温度为0℃～30℃。

5.按照权利要求1所述的一种动物角膜组织的去细胞方法，其特征在于：步骤一中进行高静压处理时在液体介质中进行，所述液体介质为磷酸盐缓冲液或生理盐水溶液。

6.按照权利要求5所述的一种动物角膜组织的去细胞方法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液或生理盐水溶液中含有透明质酸钠、硫酸软骨素、葡聚糖或海藻酸钠，当所述磷酸盐缓冲液或生理盐水溶液中含有透明质酸钠时，所述磷酸盐缓冲液或生理盐水溶液中透明质酸钠的质量浓度为0.2%～2%；当所述磷酸盐缓冲液或生理盐水溶液中含有硫酸软骨素时，所述磷酸盐缓冲液或生理盐水溶液中硫酸软骨素的质量浓度为1%～5%；当所述磷酸盐缓冲液或生理盐水溶液中含有葡聚糖时，所述磷酸盐缓冲液或生理盐水溶液中葡聚糖的质量浓度为1%～5%；当所述磷酸盐缓冲液或生理盐水溶液中含有海藻酸钠时，所述磷酸盐缓冲液或生理盐水溶液中海藻酸钠的质量浓度为0.05%～0.5%。

7.按照权利要求1所述的一种动物角膜组织的去细胞方法，其特征在于：步骤二中所述清洗液为含有透明质酸钠、硫酸软骨素、葡聚糖或海藻酸钠的磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液或生理盐水溶液；当所述清洗液为含有透明质酸钠的磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液或生理盐水溶液时，所述磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液或生理盐水溶液中透明质酸钠的质量浓度为0.2%～2%；当所述清洗液为含有硫酸软骨素的磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液或生理盐水溶液时，所述磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液或生理盐水溶液中硫酸软骨素的质量浓度为1%～5%；当所述清洗液为含有葡聚糖的磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液或生理盐水溶液时，所述磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液或生理盐水溶液中葡聚糖的质量浓度为1%～5%；当所述清洗液为含有海藻酸钠的磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液或生理盐水溶液时，所述磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液或生理盐水溶液中海藻酸钠的质量浓度为0.05%～0.5%。

8.按照权利要求1所述的一种动物角膜组织的去细胞方法，其特征在于：步骤二中将经过步骤一处理后的角膜组织置于清洗液中进行震荡清洗的清洗时间为24h～96h，且每隔2h～16h换清洗液1次。

9.按照权利要求1所述的一种动物角膜组织的去细胞方法，其特征在于：步骤二中将经过步骤一处理后的角膜组织置于清洗液中进行震荡清洗的清洗温度为0℃～50℃。

10.按照权利要求1所述的一种动物角膜组织的去细胞方法，其特征在于：步骤二中将经过步骤一处理后的角膜组织置于清洗液中进行震荡清洗的清洗转速为150rpm～300rpm。