[发明专利]一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法

权利要求书

1.一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，其特征包括以下步骤：

(1)制备发酵菌液：将固体保存的沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)与特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)采用不同改良产芽孢液体培养基进行发酵培养，得到沙福芽孢杆菌发酵菌液和特基拉芽孢杆菌发酵菌液，混合上述两种菌液，得到混合发酵菌液。

(2)制备菌肥：利用双次堆捂发酵的方法制备含有沙福芽孢杆菌和特基拉芽孢杆菌的生物菌肥；

(3)施用底肥：将步骤(2)所述含有沙福芽孢杆菌和特基拉芽孢杆菌的生物菌肥作为底肥施用，每塘施用90克，每亩施用100公斤。

(4)浇灌发酵菌液：进行步骤(3)的同时将步骤(1)所述的混合发酵菌液按照5000倍稀释，浇灌烟株。

2.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，其特征在于：所述步骤(1)中混合发酵菌液中有效活菌数≥1.0亿/g(cfu)。

3.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，其特征在于：步骤(1)中沙福芽孢杆菌采用的改良产芽孢液体培养基成分如下：葡萄糖2.5g、酵母提取物1.5g、蛋白胨1g、KH₂PO₄0.3g、NaCl 2.0g、(NH₄)₂SO₄1.0g、Na₂B₄O₇·10H₂O 4.5mg、无水CaCl₂0.33g、Na₂MoO₄·2H₂O0.03mg、H₂O 1000m1；步骤(1)中特基拉芽孢杆菌采用的改良产芽孢液体培养基成分如下：葡萄糖2.0g、蛋白胨1.0g、NaCl 1.5g、(NH₄)₂SO₄1.0g、CaCl₂·2H₂O0.07g、CuCl₂·2H₂O 0.05mg，CoSO₄0.01mg，H₂O 1000m1。

4.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，其特征在于：步骤(2)中生物菌肥有效活性菌≥0.5亿/g(cfu)。

5.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，其特征在于：步骤(2)中双次堆捂发酵的方法为：第一次发酵：以质量百分比计，取40～50％的泥碳、10～20％的油枯、10～15％的花渣、20～25％的碳氨水以及1～5％的混合发酵菌液，先混合均匀泥碳、油枯、花渣、碳氨水，加入总体积10％的水，每隔5天进行一次翻堆，堆捂时间为40天；第二次发酵：第一次发酵完成后，加入混合发酵菌液，每隔5天进行一次翻堆，二次发酵时间为15天，堆捂发酵结束后，各项指标达到国家有机肥标准NY525-2011。

6.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，其特征在于：所述步骤(4)中浇灌烟株的具体方法为：待烟株移栽后浇灌烟株根部，每亩用量为10kg；在烟株生长幼苗期，比较稀疏时采用浇灌，待烟株生长后期，烟叶茂密时采用喷灌，使用喷灌系统喷施在烟株叶面上，叶部以及根部每次喷施均要浸透，每15天喷施1次，每个月喷施2次。

7.根据权利要求3所述的一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，其特征在于：所述沙福芽孢杆菌采用的改良产芽孢液体培养基及发酵菌液通过以下方法制备：分别称取上述组分并溶于1L蒸馏水中，待溶解后用pH计调节pH至6.6～7.3，将上述溶液装于三角瓶中放在灭菌锅中于121℃灭菌20分钟，待培养基冷却后用接种环沾取1ml沙福芽孢杆菌转接到该培养基中，于37℃摇床100rpm振荡培养48hr；所述特基拉芽孢杆菌采用的改良产芽孢液体培养基及发酵菌液通过以下方法制备：分别称取上述组分并溶于1L蒸馏水中，待溶解后用pH计调节pH至6.8～7.4，将上述溶液装于三角瓶中放在灭菌锅中于121℃灭菌20分钟，待培养基冷却后用接种环沾取1ml特基拉芽孢杆菌转接到该培养基中，于37℃摇床100rpm振荡培养48hr。