[发明专利]一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂在审

专利信息
申请号: 201910184176.X 申请日: 2019-03-12
公开(公告)号: CN109991052A 公开(公告)日: 2019-07-09
发明(设计)人: 蔡清华;何浩会;孙成艳 申请(专利权)人: 迪瑞医疗科技股份有限公司
主分类号: G01N1/28 分类号: G01N1/28;G01N15/14;G01N21/78
代理公司: 长春众邦菁华知识产权代理有限公司 22214 代理人: 刘微
地址: 130103 吉林*** 国省代码: 吉林;22
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摘要:
搜索关键词: 嗜碱性粒细胞 白细胞 溶血剂 血红蛋白 阳离子表面活性剂 血红蛋白稳定剂 血红蛋白测定 缓冲溶液 非离子表面活性剂 加热装置 血液分析 非离子 人全血 溶血 分类
【说明书】:

发明公开了一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂,属于血液分析技术领域,解决现有技术不能同时测定人全血中白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白等问题。溶血剂为含有阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂和血红蛋白稳定剂的缓冲溶液,其中,阳离子表面活性剂的浓度为0.1g/L~50g/L,非离子表面性剂的浓度为0.5g/L~100g/L,血红蛋白稳定剂的浓度为0.1g/L‑50g/L,缓冲溶液的pH值为1.8~4.8。本发明简化了溶血剂的组分,在无需加热装置的情况下,溶血时间仅需10‑18s,即可完成对嗜碱性粒细胞和白细胞进行分类计数以及血红蛋白的测定,操作简单、快速,具有高度的准确性。

技术领域

本发明涉及一种溶血剂,尤其涉及一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂,属于血液分析技术领域。

背景技术

嗜碱性粒细胞是在人全血中占比例最少的一种粒细胞,健康人血液中占白细胞总数的0%~1%,在临床上,出现骨髓增生性疾病、慢性粒细胞性白血病、感染、某些食物过敏等疾病时,嗜碱性粒细胞的数量会出现明显的变化,因此在人全血检测中嗜碱性粒细胞的准确分类计数对这些疾病的正确诊断有直接指导意义。

目前,对于人全血检测中嗜碱性粒细胞准确分类和计数的方法主要包括阻抗法和光学法。采用这两种方法测定时,均不能同时对血红蛋白进行测定,如CN1113241C公开了一种在酸性介质中用聚环氧乙烷型非离子表面活性剂及一种阳离子表面活性剂对嗜碱性粒细胞进行测定的方法,该方法的检测系统为激光散射法,不能同时进行血红蛋白测定。再如US5196346 公开了一种试剂,通过保护嗜碱性粒细胞用电阻抗法测定嗜碱性粒细胞,但这种试剂不能测量血红蛋白,且对使用温度要求高,溶血速度慢,使用上不够简便。此外,采用阻抗法测定时,大血小板及疟原虫会对白细胞和嗜碱性粒细胞计数及分类产生影响。又如US3874852和US3854914描述了一种同样类型的氰化试剂,但这种试剂的主要缺点是含有氰化物,且不能对血液样本中的白细胞亚群进行分类和计数。US5242832也描述了一种相似的白细胞分类试剂,但这种试剂不能用于鉴别嗜碱性粒细胞而只能分析淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。因此,在对人全血中白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白同时进行测定时,需要同时使用两种以上的试剂,如 SYSMEX XS-800i血球仪配套使用的多种溶血素,试剂组分多,且操作复杂。

发明内容

本发明针对现有的技术问题,提供一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂,克服了现有技术中的不足,避免了阻抗法测定时大血小板及疟原虫对白细胞和嗜碱性粒细胞计数及分类的影响,通过一种试剂即可用于光学法完成全血样本中的白细胞计数和嗜碱性粒细胞计数,同时溶解红细胞进行血红蛋白测定。

为了实现上述目的,本发明提供如下技术方案:

一种用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂,其为含有阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂和血红蛋白稳定剂的缓冲溶液,其中,阳离子表面活性剂的浓度为0.1g/L~50g/L,非离子表面性剂的浓度为0.5g/L~100g/L,血红蛋白稳定剂的浓度为0.1g/L-50g/L,缓冲溶液的 pH值为1.8~4.8。

优选地,上述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂,缓冲溶液选自酒石酸/酒石酸钠缓冲体系、柠檬酸/柠檬酸钾缓冲体系、甘氨酸/盐酸缓冲体系、邻苯二甲酸/盐酸缓冲体系、磷酸氢二钠/盐酸缓冲体系、磷酸氢二钠/柠檬酸缓冲体系或柠檬酸/氢氧化钠/盐酸缓冲体系中的一种。

优选地,上述的用于白细胞、嗜碱性粒细胞计数和血红蛋白测定的溶血剂,阳离子表面活性剂选自季铵盐型表面活性剂。

进一步地优选为十二烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十四烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基氯化铵、十六烷基三甲基溴化铵、十六烷基二甲基乙基氯化铵或十六烷基二甲基乙基溴化铵中的一种。

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