[发明专利]一种快速检测奶牛子宫内膜炎中病原菌的方法

权利要求书

1.PCR引物系统在制备检测奶牛子宫内膜炎致病菌试剂中的用途，其特征在于，所述PCR引物系统包括：

1)扩增大肠埃希菌(E.coli)特异性序列的引物SEQ ID No：1和SEQ ID No：2；

2)扩增金黄色葡萄球菌(S.aureus)特异性序列的引物SEQ ID No：3和SEQ ID No：4；

3)扩增化脓隐秘杆菌(T.pyogenes)特异性序列的引物SEQ ID No：5和SEQ ID No：6；

4)扩增乳房链球菌(S.uberis)特异性序列的引物SEQ ID No：7和SEQ ID No：8；

5)扩增奇异变形杆菌(P.mirabilis)特异性序列的引物SEQ ID No：9和SEQ ID No：10；

6)扩增铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)特异性序列的引物SEQ ID No：11和SEQ ID No：12；

检测奶牛子宫内膜炎致病菌的方法步骤为：

1)细菌基因组DNA的提取：采用试剂盒方法提取培养过夜的子宫分泌物中的大肠埃希菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、化脓隐秘杆菌(T.pyogenes)、乳房链球菌(S.uberis)、奇异变形杆菌(P.mirabilis)、铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)的DNA；

2)多重PCR：在含有上述细菌DNA的反应体系中，加入上述的PCR引物系统进行扩增；

3)电泳紫外成像：配制2％琼脂糖凝胶进行凝胶电泳，电压：120V，时间：45min，随后进行电泳紫外成像。

2.根据权利要求1所述的PCR引物系统在制备检测奶牛子宫内膜炎致病菌试剂中的用途，其特征在于，所述PCR引物系统进行扩增的条件为： 94℃5min；94℃30s，54℃30s，72℃80s，30个循环；72℃10min。