[发明专利]一种冰球子种子萌发培养基配方及制备方法

说明书

本发明属于中药植物组织培养技术领域，具体涉及一种冰球子种子萌发培养基配方及制备方法。本发明所述的冰球子种子萌发培养基配方包括下述组分：1/2MS或1/4MS、0.5～2.5mg/L的6‑BA、0.1～0.3mg/L的NAA、0.1～0.25g/L的GA、40～50g/L的香蕉泥、3～15g/L的刺梨汁、2～15g/L的野葛根、1～15g/L的山楂、2～10g/L的猪苓、1～10g/L头花蓼、1～10g/L山银花。本发明的优点在于：使用刺梨汁作为培养基的制备材料之一，并在此基础上添加了其他的中药组分，能够促进种子的萌发，缩短冰球子种子的萌发时间，提高种子萌发率；与传统培养基相比，还能抑制杂菌在培养基上生长。

技术领域

本发明涉及冰球子组织培养技术领域，尤其是涉及一种冰球子种子萌发培养基配方及制备方法。

背景技术

冰球子（Oreorchis patens (Lindl.) Lindl.）又称山慈姑、毛慈姑、泥宾子系多年生兰科草本植物独蒜兰的假球茎，具有消肿、散结、化痰、解毒等功效，广泛应用于抗肿瘤药物之中。尤其巨大的药用价值，在市场上供不应求。

冰球子种子细小，在自然条件下授粉率低，种子无胚乳，无法提供发芽所需的养分，极少萌发成苗。由于近年来过度开采，导致野生冰球子资源匮乏，随着环境条件的恶化，野生冰球子分布范围也日益缩小。通过分株繁殖和种子繁殖等传统的人工栽培方法存在周期长、效率低的缺点，不适宜用于规模化种植，无法满足市场需求。植物组织快繁技术成为冰球子获取种苗的最佳选择，其周期短，繁殖系数大，培养条件可控，不受气候条件限制。

为解决冰球子传统栽培方法繁殖率低、周期长的缺点，现提出了多种解决方案。例如：中国专利文献公开了一种冰球子无性种苗快速繁育方法【授权公告号：CN 102577877B】，其主要内容包括以下步骤：1）育苗场地布置2）苗床营养土的制备3）河沙消毒4）冰球子种子的选择5）种苗培育6）育苗后进行移栽。廖婷婷等对山慈菇快速繁殖体系的建立中，以山慈菇的组织芽快为外植体，采用单因素变量法，通过对培养基、大量元素、单一激素、激素组合等因素的研究，建立山慈菇快速繁殖体系，其最适组织芽块外植体生长的培养基为1/4MS+0.1mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA+3%蔗糖+0.5%活性炭+0.55％ 琼脂，PH为5.8。尤超等对不同培养基对山慈姑种子无菌萌发的影响研究中，以山慈菇种子为外植体，筛选出诱导山慈菇种子萌发的最适培养基为1/2MS+1.5mg/L IAA + 0.05%干酪素+2%蔗糖+0.75%活性炭+0.55%琼脂，PH为5.8。

上述方案虽然在一定程度上解决了现有技术的不足，在已公开的专利中，以冰球子假球茎为繁殖材料，与种子繁殖相比，其繁殖系数小，生长速度慢；在廖婷婷等的研究中，其组织芽块外植体生长的培养基不能共同促进冰球子种子萌发和幼苗生长，且繁殖系数小，也不能够抑制杂菌的生长；在尤超等研究中，其种子萌发率低，外植体培养基容易感染杂菌。到目前，还未报道关于能够促进冰球子种子的萌发，缩短种子萌发时间，提高种子萌发率并能抑制杂菌在培养基上生长的培养基。

发明内容

本发明的目的是提供一种冰球子种子萌发培养基配方及制备方法

为达上述目的，本发明包括下列技术方案：一种冰球子种子萌发培养基配方及制备方法，其本制备配方包括的组分为：1/2MS或1/4MS、0.5～2.5mg/L的6-BA、0.1～0.3mg/L的NAA、0.1～0.25g/L的GA、40～50g/L的香蕉泥、3～15g/L的刺梨汁、2～15g/L的野葛根、1～15g/L的山楂、2～10g/L的猪苓、1～10g/L头花蓼、1～10g/L山银花、6～10g/L的卡拉胶、25～30g/L的白砂糖。

1/2MS或1/4MS作为基础培养基、6-BA、NAA和GA促进种子萌发、香蕉泥和刺梨汁利于冰球子壮苗生根。野葛根、山楂、猪苓、头花蓼和山银花属于中药组分，能够促进种子的萌发和生长，有效抑制杂菌在培养基上的生长增殖，避免培养基生长，利于提高冰球子快速繁殖的效率。