[发明专利]一种马尾藻多糖提取物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种马尾藻多糖提取物及其制备方法和应用。本发明提供了一种制备马尾藻多糖的方法，包括如下步骤：以Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂醇沉法进行马尾藻多糖分离提取，同时集成马尾藻多糖分离提取。本发明还保护所述马尾藻多糖的应用：制备水产动物饲料添加剂；制备水产动物饲料；制备水产动物免疫促进剂；制备水产动物抗病毒制剂。将本发明提取的马尾藻多糖作为免疫增强剂应用于罗氏沼虾养殖，取得了良好的免疫效果和养殖效果，为马尾藻提供了一个非常具有社会价值和经济价值的新用途，同时也为马尾藻多糖的生产开发和应用提供了有力理论依据。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种马尾藻多糖提取物及其制备方法和应用，具体涉及马尾藻多糖提取物、该马尾藻多糖提取物的制备方法以及该马尾藻多糖提取物在水产养殖中的应用。

背景技术

广西是我国罗氏沼虾虾苗生产和供应的传统产区，也是我国罗氏沼虾养殖技术的发源地。广西罗氏沼虾的年产量占全国总产苗量的80％以上，作为单一品种在我国形成了蓬勃发展的产业。罗氏沼虾育苗和养殖所创造的高额利润曾经成为我国水产行业的一个奇迹。但是，随着集约化高产化养殖模式的推广，罗氏沼虾肌肉白浊病(又称白尾病，WTD)大量发生，该病的病原体是诺达病毒(MrNV)，主要危害罗氏沼虾虾苗,患病虾苗出现肌肉白浊、白斑或白尾症状,导致病虾大量死亡,严重时死亡率可高达60％～100％，目前是罗氏沼虾育苗和养殖的主要疾病。由于引种混乱、新病原的出现、繁育技术滞后以及养殖环境的恶化等问题，导致了目前罗氏沼虾育苗成活率低、病害高发、苗种质量差，严重阻碍了广西罗氏沼虾养殖产业的健康发展。因此，推广利用既提高产品质量，又减少病害的中草药免疫增强剂防治水产养殖病害技术，是做罗氏沼虾病害防治工作的重中之重。

发明内容

本发明的目的是提供一种马尾藻多糖提取物及其制备方法和应用。

本发明提供了一种制备马尾藻多糖的方法，包括如下步骤：

(1)马尾藻干燥并粉碎；

(2)依次用水和Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂进行提取；

(3)进行干燥，得到粗提物；

(4)用胰蛋白酶处理，然后进行乙醇沉淀，然后在水中透析，然后进行干燥，得到粗多糖；

(5)依次进行离子交换层析和分子筛层析，然后进行干燥，得到马尾藻多糖。

本发明还提供了一种制备马尾藻多糖的方法，包括如下步骤：

(1)马尾藻干燥并粉碎，得到马尾藻粉；

(2)取马尾藻粉，加入水，进行提取，然后离心收集上清液；

(3)取步骤(2)得到的上清液，进行常压蒸馏，得到粗提液；

(4)取步骤(3)得到的粗提液，加入水，然后加入B溶液并反应，然后加入A溶液并反应，然后离心收集上清液；所述B溶液为含有Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂B组分的溶液；所述A溶液为含有Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂A组分的溶液；

(5)取步骤(4)得到的上清液，加入乙醇溶液，静置，然后收集沉淀；

(6)取步骤(5)得到的沉淀，依次用无水乙醇和无水丙酮洗涤，然后减压干燥至恒重，即为粗提物；

(7)取步骤(6)得到的粗提物，溶解于水，然后加入胰蛋白酶并反应，然后加入乙醇并静置，然后收集上清液；

(8)取步骤(7)得到的上清液，过滤，收集滤液；

(9)将步骤(8)得到的滤液转移到透析袋中，在水中进行透析，然后冷冻干燥，得到粗多糖；

(10)取步骤(9)得到的粗多糖，溶于水，得到上样液，然后进行离子交换层析，收集多糖峰对应的过柱后溶液，转移到透析袋中，在水中进行透析，然后冷冻干燥；