[发明专利]一种含抗菌肽的无抗生素饲料添加剂及其制备方法

说明书

本发明涉及无抗饲料添加剂技术领域，特别涉及一种含抗菌肽的无抗生素饲料添加剂，包括麦芽、玉米秸秆、乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、硫色曲霉菌、吐温‑80、梓叶、谷精草。本发明的有益效果：不含抗生素，在起到促进动物生长，提高动物抗病能力，提高日增重，降低料肉比，提高动物饲料利用效率等作用；采用3种复合菌种制备抗菌肽，克服了发酵过程PH改变对产肽的影响；秸秆壳与秸秆芯分离后使用，秸秆壳与秸秆芯分别发挥各自特点，物尽其用，提高了利用率。将梓叶与谷精草的有用物质提取出来，增强了使用效果与便利性。

技术领域

本发明涉及无抗饲料添加剂技术领域，特别涉及一种含抗菌肽的无抗生素饲料添加剂及其制备方法。

背景技术

抗生素的滥用或长期使用抗生素会对整个生态环境造成极大的安全隐患，使动物机体产生依赖性，限制了体内免疫细胞机能发挥，使动物免疫力、抗病力下降；抗生素抑制或杀死动物肠道内有害菌同时，也抑制或杀死了有益微生物，使正常微生物系统失衡；会造成动物体内抗生素残留，对食品安全造成威胁，对人体健康不利。

抗菌肽(Antimicrobial peptides，AMP)是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分

子多肽，分子量在2000～7000左右，由20～60个氨基酸残基组成。这类活性多肽多数具有广谱抗菌的特点。与抗生素相比，抗菌肽安全性高，对人和动物正常细胞无害，属无毒副作用、无残留、无致细菌耐药性的一类生物制剂，在无抗饲料中有广阔的应用前景。

现有技术中使用一种菌来生产抗菌肽，每种菌都有最适的PH，发酵过程中需要控制发酵液的PH，但是在发酵过程中发酵液的PH是不断变化的，随着发酵的进行，发酵液PH变小，枯草芽孢杆菌的产肽能力会逐渐变小直至丧失。现有技术中使用玉米秸秆为原料，一般直接粉碎使用，秸秆壳与秸秆芯不能很好得发挥各自特点；关于梓叶与谷精草的应用，中国古代就有文献报道，但是一直是以原植物直接饲喂动物，使用效果较差。

发明内容

为了解决现有技术的问题，本发明提供了一种采用3种复合菌种制备抗菌肽、可起到促进动物生长，提高动物抗病能力的含抗菌肽的无抗生素饲料添加剂及其制备方法。

本发明所述技术方案如下：

一种含抗菌肽的无抗生素饲料添加剂，包括麦芽、玉米秸秆、乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、硫色曲霉菌、吐温-80、梓叶、谷精草。

一种含抗菌肽的无抗生素饲料添加剂的制备方法，具体步骤如下：

(1)玉米秸秆壳、芯分离

利用机械技术将玉米秸秆分离开，并分别粉碎，秸秆壳粉碎成粗粉，秸秆芯粉碎成细粉；

(2)麦芽汁糖化

麦芽加水以1：4-1：6的比例制成麦芽匀浆保温45-55℃，步骤(1)中的秸秆壳粗粉蒸制后晾凉至45-55℃，与麦芽匀浆混合均匀，在糖化锅中混合并45-55度保温60-90min，进行蛋白质的分解，然后在55-60℃糖化2-4h，再升温到75-78℃，糖化2-4h，秸秆壳粉与麦芽的质量比为5：1—15：1；

(3)添加菌种发酵

将乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、硫色曲霉菌中两种以上的菌粉按照一定比例加入35-37℃含0.01％(m/m)葡萄糖的的温水中，活化1小时，将活化后的菌液均匀拌入糖化后的秸秆粗粉中，装入发酵桶保持温度35-37℃，持续发酵10h，发酵完成添加0.01％(m/m)的吐温-80并均匀搅拌后压滤，滤液10000—12000r/min离心8-10min，得到发酵液上清液，上清液通过截留分子量为20kDa的超滤膜超滤，收集的滤液再经过截留分子量为1000Da的超滤膜超滤，弃去滤过液，所得即是含抗菌肽的发酵液，抗菌肽活性达6000U/ml，菌粉总重量至少为麦芽重量的1/10；

(4)含抗菌肽的发酵液与玉米芯粉混合