[发明专利]猪流行性腹泻病毒基因工程亚单位疫苗在审

专利信息
申请号: 201910194374.4 申请日: 2019-03-14
公开(公告)号: CN109908336A 公开(公告)日: 2019-06-21
发明(设计)人: 曹文龙;孔迪;滕小锘;易小萍;张大鹤 申请(专利权)人: 苏州世诺生物技术有限公司
主分类号: A61K39/215 分类号: A61K39/215;A61P31/14;C07K14/165;C12N15/50
代理公司: 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 代理人: 王锋
地址: 215123 江苏省苏州*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 基因工程亚单位疫苗 猪流行性腹泻病毒 核酸分子编码 蛋白糖基化 核苷酸序列 免疫组合物 核酸分子 抗原蛋白 免疫原性 悬浮培养 疫苗使用 疫苗制备 真核表达 重组细胞 表达量 生产成本 申请
【说明书】:

本申请提供了一种免疫组合物及基因工程亚单位疫苗,包含:采用SEQ ID NO:1的核酸分子或者与SEQ ID NO:1的核苷酸序列95%以上相同的核酸分子编码的猪流行性腹泻病毒S1蛋白。该疫苗使用CHO细胞真核表达,蛋白糖基化充分,抗原蛋白免疫原性好,并且表达量非常高,达到2‑3g/L,重组细胞能够大规模悬浮培养,大大降低了疫苗制备的复杂程度,降低了生产成本。

技术领域

本申请涉及动物免疫药物技术领域,具体而言,涉及一种猪流行性腹泻病毒基因工程亚单位疫苗。

背景技术

猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)引起的一种以呕吐、腹泻和脱水为主要症状的肠道传染病。该病对各种年龄阶段的猪均易感,尤其是7日龄以内的哺育仔猪,感染后死亡率极高。

PEDV为冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)的成员,目前发现只有一个血清型。PEDV是具有囊膜的单链正股RNA病毒,属于I型冠状病毒。PEDV S蛋白为伸出病毒颗粒囊膜的20nm球杆形糖蛋白,分子量约为180-220kDa,约由1383个氨基酸组成,该蛋白在诱导中和抗体、调节与宿主细胞受体糖蛋白相互作用以介导病毒进入、结合细胞、促进病毒和细胞融合等方面发挥着重要作用。S蛋白可以人为分为S1蛋白和S2蛋白,S1蛋白存在识别宿主细胞上的入胞受体表位,能够促进病毒囊膜与细胞膜的融合,从而介导病毒的入侵。S1蛋白还包含PEDV主要的中和抗原表位和受体结合域,是研究开发猪流行性腹泻基因工程疫苗的重要靶蛋白。

目前用于预防、控制猪流行性腹泻的疫苗较多都是传统PEDV弱毒苗和灭活疫苗,有少数基因工程亚单位疫苗。但灭活疫苗存在自身免疫保护力较弱,且存在灭活不完全,造成散毒的风险;弱毒活疫苗存在毒株毒力返强的风险。

专利CN108822191A公开了一种猪流行性腹泻病毒S蛋白及其亚单位疫苗及其制备方法和应用,该专利使用CHO细胞表达PEDV-S蛋白,但PEDV-S基因必须进行优化后才可以使用CHO细胞进行表达,否则CHO细胞基本不表达PEDV-S蛋白。

专利CN107619819A公开了一种稳定表达猪流行性腹泻病毒S1蛋白的重组细胞系、疫苗和应用,该专利使用人胚胎肾细胞HEK-293T细胞表达S1蛋白,但HEK-293T细胞的表达量较CHO细胞低,且CHO细胞更成熟,较HEK-293T细胞更易培养。

本发明因此而来。

发明内容

本申请旨在提供一种免疫组合物,以解决现有技术中的问题。

为了实现上述目的,根据本申请的一个方面,提供了一种免疫组合物,包含:

采用SEQ ID NO:1的核酸分子或者与SEQ ID NO:1的核苷酸序列95%以上相同的核酸分子编码的猪流行性腹泻病毒S1蛋白。

本发明进一步的技术方案是:所述的猪流行性腹泻病毒S1蛋白包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:2的全长氨基酸序列95%以上相同的氨基酸序列。

本发明的另一目的在于提供一种所述的免疫组合物用于生产用于在受试动物中诱导针对猪流行性腹泻病毒抗原的免疫反应的药剂的用途。

本发明的又一目的在于提供一种所述的免疫组合物用于生产用于预防猪流行性腹泻病毒感染的药剂的用途。

本发明的又一目的在于提供一种核酸分子,一种核酸分子,其可以用于编码猪流行性腹泻病毒S1蛋白,包含SEQ ID NO:1的顺序核苷酸序列或者与SEQ ID NO:1的核苷酸序列95%以上相同的顺序核苷酸序列。

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