[发明专利]一种从灵芝中提取活性成分的方法在审
申请号: | 201910197598.0 | 申请日: | 2019-03-15 |
公开(公告)号: | CN109893548A | 公开(公告)日: | 2019-06-18 |
发明(设计)人: | 裴海生;孙君社;王民敬;邵广 | 申请(专利权)人: | 农业农村部规划设计研究院 |
主分类号: | A61K36/074 | 分类号: | A61K36/074;C08B37/00;B01J20/10;B01J20/28;B01J20/30 |
代理公司: | 青岛华慧泽专利代理事务所(普通合伙) 37247 | 代理人: | 李新欣 |
地址: | 100125 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 浸提 蛋白质吸附剂 灵芝 乙醇提取物 浸提液 剩余物 超声 去除 制备 爆破 蛋白酶 碱性电解水 灵芝子实体 酸性电解水 超声处理 成分提取 灵芝多糖 灵芝活性 灵芝三萜 硼氢化钠 溶液浓缩 乙醇浸提 粗提物 提取物 吸附剂 渣滓 核苷 洗脱 肽类 浸泡 过滤 震荡 | ||
1.一种从灵芝中提取活性成分的方法,其特征在于,包括:
(1)爆破超声处理:将灵芝子实体粉碎,加入一定量的酸性电解水进行浸泡处理,浸泡至酸性电解水被物料吸收后进行第一次超声处理,然后将第一次超声后物料加入爆破装置进行爆破,爆破后,将爆破物料进行第二次超声处理;
(2)醇提:向步骤(1)处理后物料中加入乙醇进行浸提,获得乙醇提取物以及浸提剩余物;
(3)以步骤(2)制备获得的乙醇提取物为原料,制备获得灵芝三萜粗提物以及核苷类提取物;
(4)向步骤(2)制备获得的浸提剩余物中加入碱性电解水及硼氢化钠混合均匀后进行浸提,过滤后获得浸提液及浸提渣滓;将所述浸提渣滓进行干燥处理,得到灵芝纤维;
(5)向步骤(4)获得的浸提液中加入蛋白质吸附剂进行吸附,震荡一定时间后,抽滤去除蛋白质吸附剂,将去除吸附剂的溶液浓缩干燥后获得灵芝多糖;将吸附处理后的蛋白质吸附剂进行洗脱,向洗脱液中加入蛋白酶获得灵芝肽类产品。
2.根据权利要求1所述一种从灵芝中提取活性成分的方法,其特征在于,步骤(1)具体为:将灵芝子实体粉碎,按照料液比10:(3-6)g/mL加入pH为2.5-4.0的酸性电解水,浸泡2-3h后,酸性电解水被物料充分吸收,然后进行第一次超声处理时间为20-40min,第一次超声功率为500-1000W;将第一次超声后物料加入爆破装置进行爆破,爆破压强为0.7-0.9MPa,爆破处理温度为190-230℃,保压时间为10-120秒;爆破后,将爆破物料进行第二次超声处理;第二次超声处理时间为50-90min,第二次超声处理功率为3000-5000W。
3.根据权利要求1所述一种从灵芝中提取活性成分的方法,其特征在于,步骤(2)中:向步骤(1)处理后物料中加入的乙醇体积与物料体积比为(2-4):1,加入的乙醇质量百分数为85%-95%,浸提时间为4-5h。
4.根据权利要求1所述一种从灵芝中提取活性成分的方法,其特征在于,步骤(3)具体为:将步骤(2)制备获得的乙醇提取物溶于水,加入乙醚进行一次萃取,分离获得一次萃取有机溶液和一次萃取水溶液,将所述一次萃取水溶液中加入乙酸乙酯进行二次萃取,将二次萃取水溶液通过阳离子树脂处理,流出的溶液及水洗液通过大孔树脂色谱,得到灵芝核苷类提取物;将所述一次萃取有机溶液浓缩干燥获得灵芝三萜粗提物。
5.根据权利要求1所述一种从灵芝中提取活性成分的方法,其特征在于,在步骤(4)中,加入的硼氢化钠、碱性电解水和所述浸提剩余物的体积比为(0.05-0.15):(5-10):1,碱性电解水的pH为9.5-11.0,浸提时间为2-3h,浸提温度为30-45℃。
6.根据权利要求1所述一种从灵芝中提取活性成分的方法,其特征在于,步骤(5)中加入的蛋白质吸附剂的制备方法为:
(1)合成表面带巯基的介孔二氧化硅纳米材料:将水、乙醇、二乙醇胺和十六烷基三甲基氯化铵水溶液混合,在50-60℃下搅拌反应0.5-1h,随后加入四乙氧基硅烷和巯基丙基三甲氧基硅烷,继续搅拌反应2-3h;反应完成后,用乙醇和水的混合液离心洗涤2-6次,获得反应物;将浓盐酸缓慢的加入到乙醇溶液中,配置成混合液,并将所述反应物分散在所述混合液中,在55-60℃下搅拌反应18-24h;然后用乙醇和水的混合液离心洗涤2-5次以去除表面活性剂,制备获得表面带巯基的介孔二氧化硅纳米材料;
(2)合成铜离子修饰的介孔二氧化硅纳米材料:将步骤(1)制备获得的表面带巯基的介孔二氧化硅纳米材料分散在水中,并调pH至7-7.5之间,搅拌反应0.5-3h,加入铜盐水溶液,继续搅拌反应8-10h,抽滤并用超纯水洗涤去除多余铜离子,干燥至恒重,得到铜离子修饰的介孔二氧化硅纳米材料,即为所述蛋白质吸附剂。
7.根据权利要求1所述一种从灵芝中提取活性成分的方法,其特征在于,步骤(5)中,采用0.3-0.5g/mL尿素和0.5-0.7g/mL咪唑混合溶液进行洗脱,洗脱后蛋白质吸附剂能够重复使用。
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