[发明专利]一种简单高效的单克隆抗体的纯化方法

权利要求书

1.一种简单高效的单克隆抗体的纯化方法，其特征在于，包括：

对含有单克隆抗体的样品进行粗提纯；

对所述粗提纯的产物进行透析；

利用HPLC法对所述透析的产物进行纯化，

其中，所述纯化采用阴离子交换介质，以流动相A和流动相B为洗脱液，流速为1～3mL/min，利用梯度洗脱模式进行洗脱，柱温35～40℃，检测波长280nm；

所述流动相A为三羟甲基氨基甲烷缓冲液，所述流动相B为三羟甲基氨基甲烷缓冲液和氯化钠的混合溶液。

2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述流动相A的pH值为6.5～8.5；所述流动相B的pH值为6.5～8.5。

3.根据权利要求2所述的纯化方法，其特征在于，所述三羟甲基氨基甲烷缓冲液的终浓度为10～50mmol/L；所述氯化钠的终浓度为0.5～1mol/L。

4.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述含有单克隆抗体的样品包括：含有单克隆抗体的小鼠腹水、含有单克隆抗体的杂交瘤细胞的培养上清、重组单克隆抗体的发酵上清。

5.根据权利要求1或4所述的纯化方法，其特征在于，所述单克隆抗体包括：抗人CTGF单克隆抗体或抗人periostin单克隆抗体。

6.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述阴离子交换介质是Q SepharoseFF系列、Capto Q系列、SOURCE Q系列、Propac-wax系列的阴离子交换凝胶。

7.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，选用长度为20～30cm的色谱柱，填料粒径为2～10μm。

8.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，对含有单克隆抗体的样品进行粗提纯的步骤包括：

基于盐析法采用饱和硫酸铵溶液对含有单克隆抗体的样品进行盐析。

9.根据权利要求8所述的纯化方法，其特征在于，所述盐析法包括：于含有单克隆抗体的样品中先后加入饱和硫酸铵溶液至终浓度分别为体积百分浓度为40％～60％和30％～40％，分别于4℃盐析2小时，离心。

10.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，对所述粗提纯的产物进行透析的步骤包括：

采用三羟甲基氨基甲烷缓冲液对所述粗提纯的产物进行透析。