[发明专利]白桦醇及其衍生物在具有抗肝纤维化作用药物中的应用

说明书

本发明公开了一类白桦醇衍生物或其药学上可成的盐及其制备抗肝纤维化药物中的应用。本发明利用微生物转化技术，对白桦醇成功地进行了结构修饰，获得了多个新型化合物，通过体外抗肝纤维化细胞试验证实，这些化合物具有较好的抗肝纤维化活性，可以作为抗肝纤维化药物的活性成分，具有广泛的用途。

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及白桦醇衍生物在制备具有抗肝纤维化作用药物中的应用，更具体的涉及白桦醇衍生物在制备预防和治疗肝纤维化药物中的应用。

背景技术

肝纤维化是各种致病因素导致肝损伤后，肝星状细胞被激活成为具有很强的生成细胞外基质能力的肌成纤维样细胞，继而胶原酶抑制物生成增多，胶原酶活性也下降，使肝脏细胞外基质的生成与降解间比例失衡，最终导致肝脏胶原的过度沉积成为肝纤维化。肝纤维化继续恶化导致肝硬化甚至肝癌，所以“肝炎-肝纤维化-肝硬化-肝癌”这一链条被公认为是各种慢性肝病导致严重后果的共同途径。研究表明肝纤维化经过适当的治疗是可以逆转的，只要能够减缓或阻止肝纤维化的发生，就可以减轻或治愈肝脏损伤病理进程。因此，抗肝纤维化的治疗是切断这一链条的有效手段，对肝病领域的研究具有深远意义。肝星状细胞目前被公认为是细胞外基质的主要来源细胞，肝星状细胞的激活是肝纤维化形成初始的中心环节。所以，抑制肝星状细胞的活化是治疗肝纤维化的最有效途径。

白桦醇是一类结构比较特殊的五环三萜类成分。其结构特点是E环为五元碳环，且在E环19位有异丙基以α-构型取代，五个环间均为反式排列。该类成分主要分布于桦树皮、酸枣仁、天门冬、白头翁等中药材中，是上述中药的主要有效成分。现代药理研究发现，白桦醇类化合物具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、降脂、保肝和肾保护作用。但是，五环三萜类化合物结构特殊，母核缺乏活泼基团，反应位点少，采用常规化学反应方法难以制备出满足要求的衍生物。

微生物转化是利用生物体自身特异性的酶体系进行的酶催化反应，反应的类型多，并具有高度立体及区域选择性，成为了有机合成中的一个重要工具。将其用于白桦醇的衍生物制备，能为该类型化合物的后续研究提供大量样本。

发明内容

本发明的目的是提供白桦醇衍生物或其药学上可成的盐在在制备治疗肝病药物中的应用，所述肝病为与肝纤维化有关的疾病，如慢性肝炎、肝硬化或肝癌。所述药物为抗肝纤维化药物。所述白桦醇衍生物为结构式为1-9的化合物：

化合物2、3、4、5、6、7、8和9为本发明首次公开的白桦醇新衍生物。

本发明还提供了上述白桦醇衍生物的制备方法，包括如下步骤：

(1)发酵培养微生物，向培养基中加入白桦醇，接着进行转化培养，除去菌丝体后得到发酵液，所述微生物为毛霉(Mucor)属的菌株；

(2)将所述发酵液经萃取后，蒸干萃取液，得到转化粗提物；

(3)将所述转化粗提物以硅胶柱层析，采用二氯甲烷–甲醇系统，收集合并组分；

(4)将所述组分用反相高效液相色谱纯化，得到产物。

上述方法步骤(1)中培养基中白桦醇的浓度为2-5000μg/mL。

上述方法步骤(2)中萃取溶剂为常规机型有机溶剂，优选乙酸乙酯。

上述方法步骤(3)优选反相高效液相色谱制备条件为半制备用色谱柱YMC ODS-A，10.0I.D×250mm，乙腈-水(55:45，V/V)，流速2.0mL/min，示差检测器进行检测。

其中，微生物优选为毛霉(Mucor)属菌株，更优选总状毛霉。

文献BioorganicMedicinal Chemistry 2010,18,2549公开了制备化合物1的方法。