[发明专利]儿童腺病毒肺炎相关的外泌体miRNA及应用

说明书

本发明公开了儿童腺病毒肺炎相关的外泌体miRNA及应用，miRNA对为：miR‑103b‑5p/miR‑98‑5p或miR‑450a‑5p/miR‑103a‑3p。本发明的miRNA对，可以很好地区分儿童腺病毒肺炎和正常儿童，通过定量miRNA在儿童血清中的表达情况，有可能得到快速、简便地对儿童腺病毒肺炎进行诊断。为儿童腺病毒肺炎引起的难治疗提供早期诊断，尽快控制病毒，为完全治愈提供诊断依据。

技术领域

本发明涉及一种分子诊断标志，特别涉及一种儿童腺病毒肺炎相关的外泌体miRNA。

背景技术

平均每年大约有130万儿童死于肺炎，其中人类腺病毒的感染是引起儿童和青少年社区型肺炎的主要原因。儿童腺病毒肺炎又称小儿腺病毒肺炎，是病毒性肺炎中较常见的一种，多见于6个月～2岁的婴幼儿。冬、春两季发病率较高，多通过呼吸道传染。起病特点为急骤发热，往往自发病第1、2日体温达39℃，一般可持续1周以上，抗生素治疗无效。腺病毒肺炎是我国发病率较高的病毒性肺炎，流行地区广，以冬春季发病率最高，以三型、七型及十一型腺病毒感染为主，其他各型亦均有报道。主要病理改变是支气管炎和肺泡间质炎，严重者病灶互相融合，气管、支气管上皮广泛坏死，坏死组织和炎症浸润物充满支气管腔内，引起支气管腔闭塞，加上肺实质的严重炎性病变，更妨碍了通气和气体的交换，最后导致低氧血症和二氧化碳潴留，使全身代谢过程和重要器官的功能发生障碍。不可治疗的严重的腺病毒肺炎的死亡率每年达50％。

传统的腺病毒引起肺炎的判断标准是基于鉴定呼吸道样本的腺病毒片段的PCR反应，包括来自咽试纸和肺泡灌洗液的样本。然而，这个技术有些限制的地方，比如不能够较早的或有效的预测下呼吸道的腺病毒肺炎。因此，寻找新的腺病毒肺炎的鉴定方法是很有必要的。

微小RNA(miRNAs或miRs)是一种单链的19-24核苷酸长度的RNA小分子，miRNA通过与目标信使核糖核酸(mRNA)通过碱基互补结合，进而抑制转录后的基因表达，在调控基因表达、细胞周期、生物体发育时序等方面起重要作用。在动物中，一个miRNA通常可以调控数十个基因。

近年来，血清miRNA被报道为稳定的，可以用来预测多种肿瘤进程的分子。血清/血浆miRNA是一种新型的，非扩散性的生物标记物，已经有多篇文章包括了其可以用于诊断多种疾病的发生。

外泌体miR-103b-5p被报道可以作为结直肠腺癌的诊断分子。外泌体miR-103a-3p被报道可以当做腺瘤的诊断分子。外泌体miR-450a-5p也被报道可以作为多种肿瘤的标志分子。外泌体miR-98-5p的功能还没有发现过，而细胞内的miR-98-5p被报道参与I型干扰素的产生。然而，到目前为止，还没有文章报道过这些miRNA能够指示儿童腺病毒肺炎。

由于外泌体miRNA不存在内参miRNA，在使用miRNA作为诊断标志时，一般需要使用miRNA对，这进一步增加了诊断标志确定的难度。

参考文献：

Agweyu A,Kibore M,Digolo L,Kosgei C,Maina V,Mugane S,Muma S,WachiraJ,Waiyego M and Maleche Obimbo E:Prevalence and correlates of treatmentfailure among Kenyan children hospitalised with severe community acquiredpneumonia:A prospective study of the clinical effectiveness of WHO pneumoniacase management guidelines.Trop Med Int Health 19:1310 1320,2014.