[发明专利]一种研究miR-34a基因和糖尿病心血管疾病关联的实验方法

说明书

本发明公开了一种研究miR‑34a基因和糖尿病心血管疾病关联的实验方法，涉及糖尿病心血管疾病研究相关领域，为解决现有技术中的若干危险因素同时影响心血管并发症和糖尿病的发生，需要从各个方面去减少危险因素带来的并发症，但是治疗周期长，见效慢的问题。包括如下步骤：步骤一：通过链脲霉素和维生素D3联合尼古丁灌胃建立糖尿病小鼠大动脉血管钙化模型；步骤二：应用大动脉显微CT成像技术在体观察主动脉钙化程度；步骤三：应用血浆生物学检测目的蛋白表达水平；步骤四：应用ICP离子发射仪检测离体主动脉中钙磷含量，HE染色和Von Kossa染色评价主动脉钙化的程度。

技术领域

本发明涉及糖尿病心血管疾病研究相关领域，具体为一种研究miR-34a基因和糖尿病心血管疾病关联的实验方法。

背景技术

糖尿病心血管疾病，是糖尿病患者并发或伴发的心血管疾病，包括糖尿病心肌病变、心血管自主神经病变、高血压以及冠状动脉心脏病变。过去对糖尿病的心脏病变大都仅注意冠心病，然而大量证据表明糖尿病心脏病绝非单纯从冠状动脉粥样硬化可以解释，糖尿病心脏病变可更多累及心肌、营养心肌的小血管及自主神经。糖尿病患者较非糖尿病患者心血管病的发病率和病死率高2－3倍，无论在病因、发病机制、病理生理、临床表现以及患病率等方面糖尿病性心脏病均较非糖尿病冠心病更为复杂而不同。

若干危险因素同时影响心血管并发症和糖尿病的发生，包括肥胖、体力活动少、遗传、性别和年龄增长，因此对糖尿病心血管疾病进行治疗时需要病患的配合，从各个方面去减少危险因素带来的并发症，但是治疗周期长，见效慢；因此市场急需研制一种研究miR-34a基因和糖尿病心血管疾病关联的实验方法来帮助人们解决现有的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种研究miR-34a基因和糖尿病心血管疾病关联的实验方法，以解决上述背景技术中提出的若干危险因素同时影响心血管并发症和糖尿病的发生，需要从各个方面去减少危险因素带来的并发症，但是治疗周期长，见效慢的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种研究miR-34a基因和糖尿病心血管疾病关联的实验方法，包括如下步骤：

步骤一：通过链脲霉素和维生素D3联合尼古丁灌胃建立糖尿病小鼠大动脉血管钙化模型；

步骤二：应用大动脉显微CT成像技术在体观察主动脉钙化程度；

步骤三：应用血浆生物学检测目的蛋白表达水平；

步骤四：应用ICP离子发射仪检测离体主动脉中钙磷含量，HE染色和Von Kossa染色评价主动脉钙化的程度。

优选的，所述步骤一中，糖尿病血管钙化模型中将同源小鼠分为三组，分别为CON组、DM组和DM+VDN组。

优选的，所述CON组中，同源小鼠给予标准饮食。

优选的，所述DM组中，8周前给予同源小鼠高脂肪饮食，第8周用STZ诱导2型糖尿病后给予同源小鼠标准饮食。

优选的，所述DM+VDN组中，8周前给予同源小鼠高脂肪饮食，第8周用STZ诱导2型糖尿病，第9周给予维他命D3+尼古丁。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1、该发明通过miR-34a基因与糖尿病心血管疾病的关系，在早期诊断糖尿病心血管疾病中，通过监测糖尿病心血管疾病患者的miR-34a水平，识别可能患心脏病的高危人群，能够在早期对糖尿病心血管疾病患者进行预警；

2、该发明中miR-34a在糖尿病动脉钙化小鼠血清及主动脉中表达升高，因此可以进行miR-34a在制备以miR-34a为靶点的药物中的应用，可以设计以miR-34a为靶点的新药，为制备防治糖尿病心血管疾病的药物提供新靶点，相比于传统对糖尿病心血管疾病患者的治疗，若干危险因素对糖尿病心血管疾病患者的影响较小，见效较快，且治疗周期较短。