[发明专利]一种圆弧青霉发酵培养基及培养条件与应用

说明书

本发明公开一种圆弧青霉发酵培养基及培养条件与应用，本发明的圆弧青霉发酵培养基组分及重量含量为：右旋糖酐1‑6％、酵母膏0.1‑0.6％、KCl 0.001‑0.1％、FeSO₄0.001‑0.008％、K₂HPO₄0.001‑0.25％，余量为蒸馏水；培养条件为：培养基的初始pH值为5.0‑7.5，装液量为20‑100mL/250mL，接种量为1‑10％，发酵温度为20‑40℃，转速为50‑250r/min，发酵时间为68‑76h。本发明的圆弧青霉发酵培养基可大幅度提高右旋糖酐酶的酶活，最高达到53.18U/mL，而且原料成本低廉，培养方法简单，容易达到，具有良好的经济效益。

技术领域

本发明属于生物化工领域，具体涉及一种圆弧青霉发酵培养基及培养条件与应用。

背景技术

右旋糖酐酶是一种可以特异性催化水解右旋糖酐α-1-6糖苷键的酶。右旋糖酐酶催化得到的特定分子量的右旋糖酐在医药方面有着重要的应用，中低分子量的右旋糖酐(20-70kDa)可以用作血浆替代品；右旋糖酐(10kDa)具有渗透利尿作用；微分子量的右旋糖酐(6-8kDa)可以络合铁用于治疗缺铁性贫血；分子量不足5kDa的右旋糖酐进行硫酸化修饰可用于抗血栓，其衍生物还可用于抗病毒。除此之外，右旋糖酐酶在防治龋齿、治疗牙斑、防止葡聚糖的生成而造成污染、制备细胞毒性右旋糖酐缀合物等方面都有着重要的应用，因此右旋糖酐酶有着广阔的市场前景。

绳状青霉、淡紫拟青霉、细丽毛壳菌和圆弧青霉等菌体都可用于产右旋糖酐酶，但现有的发酵培养基和发酵培养条件不利于产酶，得到的发酵粗酶液酶活偏低。

发明内容

针对以上问题，本发明提供一种圆弧青霉发酵培养基及培养条件与应用，本发明对圆弧青霉发酵培养基和培养条件进行优化，用于生产右旋糖酐酶，可以大幅度提高右旋糖酐酶的酶活，进而提高酶产量。

本发明通过以下技术方案实现：

一种圆弧青霉发酵培养基，其组分及重量含量为：右旋糖酐1-6％、酵母膏0.1-0.6％、KCl 0.001-0.1％、FeSO₄ 0.001-0.008％、K₂HPO₄ 0.001-0.25％，余量为蒸馏水。

作为技术方案的优选，其还包括0.001-0.1％MgSO₄。

作为技术方案的优选，所述右旋糖酐为右旋糖酐T20、右旋糖酐T40和右旋糖酐T70中的任意一种。

作为技术方案的进一步优选，所述右旋糖酐为右旋糖酐T20。

作为技术方案的优选，其组分及重量含量为：右旋糖酐3-5％、酵母膏0.3-0.5％、KCl 0.001-0.08％、MgSO₄ 0.001-0.04％、FeSO₄ 0.002-0.006％、K₂HPO₄ 0.05-0.15％，余量为蒸馏水。

作为技术方案的进一步优选，其组分及重量含量为：右旋糖酐3％、酵母膏0.4％、KCl 0.04％、MgSO₄ 0.02％、FeSO₄ 0.004％、K₂HPO₄ 0.1％，余量为蒸馏水。

一种如上所述的圆弧青霉发酵培养基的培养条件为：培养基的初始pH值为5.0-7.5，装液量为20-100mL/250mL，接种量为1-10％，发酵温度为20-40℃，转速为50-250r/min，发酵时间为68-76h。

作为技术方案的优选，所述培养条件为：培养基的初始pH值为5.5-6.5，装液量为40-80mL/250mL，接种量为2-4％，发酵温度为25-35℃，转速为100-200r/min，发酵时间为70-74h。