[发明专利]氯苯类有机污染场地可通过厌氧微生物降解作用发生自然衰减的评估方法

权利要求书

1.一种氯苯类有机污染场地可通过厌氧微生物降解作用发生自然衰减的评估方法，其特征在于，具体步骤如下：

（1）采集污染场地中污染区域地下水样品并提取样品DNA；

所述污染区域包括污染源区域、背景无污染区域和污染羽区域；

(2)对步骤（1）提取的样品DNA进行qPCR反应，分别扩增Dehalobacter菌株、Dehalogenimonas菌株和Dehalococcoides菌株；同时以已知浓度的Dehalobacter菌株、Dehalogenimonas菌株和Dehalococcoides菌株的16S rRNA基因质粒作为qPCR实验的标样；获得总细菌、Dehalobacter菌株、Dehalogenimonas菌株和Dehalococcoides菌株的数量；

其中，Dehalobacter菌株的正链引物和反链引物分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；Dehalogenimonas菌株的正链引物和反链引物分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；Dehalococcoides菌株的正链引物和反链引物分别如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示；

(3)对总细菌、Dehalobacter菌株、Dehalogenimonas菌株和Dehalococcoides菌株数量评估，若污染源区和污染羽区域中ehalobacter菌株、Dehalogenimonas菌株和Dehalococcoides菌株的总数量高于10⁴个/L地下水，则说明场地中有进行厌氧微生物修复的潜力；若污染源区和污染羽区域中ehalobacter菌株、Dehalogenimonas菌株和Dehalococcoides菌株的总数量高于10⁶个/L地下水，则说明场地中存在氯苯类物质的还原脱氯反应。

2.根据权利要求1所述一种氯苯类有机污染场地可通过厌氧微生物降解作用发生自然衰减的评估方法，其特征在于，步骤（1）中，所述污染区中，每个区域至少采集3个平行地下水样品，每份地下水样品至少含有1L地下水。

3.根据权利要求1所述一种氯苯类有机污染场地可通过厌氧微生物降解作用发生自然衰减的评估方法，其特征在于，步骤（2）所述qPCR反应体系包括：Eva Green 10μL、10 μM的正链引物1 μL、10 μM的反链引物 1μL、DNA模板 2μL、以水补足至20μL；

qPCR反应程序为：98℃预热2min；98℃加热5s，Tm值温度加热10s，65℃延伸10s，重复39次；4℃保藏。