[发明专利]一种检测人ABO血型试纸条、制备方法、检测方法及应用有效
申请号: | 201910210018.7 | 申请日: | 2019-03-19 |
公开(公告)号: | CN109917141B | 公开(公告)日: | 2022-05-10 |
发明(设计)人: | 钟乾兴;肖江群;王保丹 | 申请(专利权)人: | 迪佰(厦门)生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/80 | 分类号: | G01N33/80;G01N33/533;G01N33/558;G01N21/64 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 曹桓 |
地址: | 361000 福建省厦门市海沧区翁角西*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 abo 血型 试纸 制备 方法 应用 | ||
1.一种检测人ABO血型的试纸条,其特征在于,包括聚酯板以及与聚酯板上边缘粘结的吸水纸,在所述聚酯板上表面沿层析方向依次铺设有样品垫和预先包被好抗A、抗B和抗RBC的硝酸纤维素膜,且所述硝酸纤维素膜的上边缘与所述吸水纸的下边缘搭接,所述硝酸纤维素膜的下边缘与所述样品垫的上边缘粘接,所述样品垫上铺设有溶血剂和细胞膜荧光染料;
所述溶血剂包括表面活性剂Triton X-100;所述细胞膜荧光染料为长链二烷基羰花青化合物DiO水溶液。
2.根据权利要求1所述的检测人ABO血型的试纸条,其特征在于,所述Triton X-100的浓度为0.05-1%。
3.根据权利要求2所述的检测人ABO血型的试纸条,其特征在于,所述Triton X-100的浓度为0.1%。
4.根据权利要求3所述的检测人ABO血型的试纸条,其特征在于,所述Triton X-100在一根试纸条上的添加量为30-60ul。
5.根据权利要求4所述的检测人ABO血型的试纸条,其特征在于,所述Triton X-100在一根试条上的添加量为40ul。
6.根据权利要求1所述的检测人ABO血型的试纸条,其特征在于,所述长链二烷基羰花青化合物DiO水溶液的浓度为0.1-1.5‰。
7.根据权利要求6所述的检测人ABO血型的试纸条,其特征在于,所述长链二烷基羰花青化合物DiO水溶液的浓度为1.0‰。
8.根据权利要求1所述的检测人ABO血型的试纸条,其特征在于,所述试纸条外端组装有卡壳,所述卡壳下方开设有加样孔。
9.一种如权利要求1-8任一项所述的检测人ABO血型的试纸条的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)提供吸水纸、包被有抗A、抗B和抗RBC的硝酸纤维素膜以及铺设有溶血剂和细胞膜荧光染料的样品垫;
(2)将所述吸水纸、所述硝酸纤维素膜以及所述样品垫依次铺设在聚酯板上,以形成检测试纸条大板。
10.根据权利要求9所述的检测人ABO血型的试纸条的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)还包括,将所述检测试纸条大板用切刀机分切成预设规格的试纸条初品,将所述试纸条初品与对应规格的带有加样窗口的卡壳组装形成检测人ABO血型试纸条。
11.根据权利要求9所述的检测人ABO血型的试纸条的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中硝酸纤维素膜上的抗体采用包被缓冲液进行包被,所述抗体的包被浓度为1-5mg/mL,所述包被缓冲液包括磷酸缓冲液和蔗糖,所述磷酸缓冲液的浓度为10-50mmol,pH为7.2-7.5,所述蔗糖的浓度为0.8-1.5%。
12.根据权利要求11所述的检测人ABO血型的试纸条的制备方法,其特征在于,所述磷酸缓冲液的浓度为30mmol,pH为7.5,所述蔗糖的浓度为1%。
13.一种使用如权利要求1-8任一项所述的试纸条的检测人ABO血型的方法,其特征在于,包括如下步骤:在加样孔中加入全血样本5-10μL,待样本与样品垫充分接触后,滴加1-3滴10mmol,pH7.4的PBS样本冲洗液,12-15分钟后,在484nm波长下的激发光下,即可检测到501nm发射光信号。
14.根据权利要求13所述的检测人ABO血型的方法,其特征在于,所述检测人ABO血型的方法包括将所述试纸条插入配套的免疫荧光检测仪进行检测。
15.一种人ABO血型检测试剂盒,其特征在于,包括如权利要求13所述的试纸条和样本冲洗液。
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