[发明专利]加快土壤重金属污染修复的微生物菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.微生物菌剂，其特征在于包含复合菌剂I，所述复合菌剂I由腐殖质呼吸菌和益生菌组成，其中所述所述腐殖质呼吸菌由腐败假单胞菌(Shewanella putrefaciens)、金属还原地杆菌(Geobacter metallireducens)和海藻希瓦氏菌(Shewanella alga)组成，所述益生菌由厌氧氨氧化布罗卡德氏菌(Brocadia anammoxidans)和枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)组成，优选地，腐败假单胞菌(S.putrefaciens)、金属还原地杆菌(G.metallireducens)、海藻希瓦氏菌(S.alga)、厌氧氨氧化布罗卡德氏菌(B.anammoxidans)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis)的质量比为A∶B∶C∶D∶E，其中A选自2-4的数字，B选自2-4的数字，C选自1-3的数字，D选自1-3的数字，E选自3-5的数字。

2.权利要求1的微生物菌剂，其特征在于还包含生物活性物质，所述生物活性物质由糖(例如葡萄糖，果糖，乳糖，麦芽糖，优选葡萄糖)和氨基酸组成，所述复合菌剂I，糖和氨基酸组成复合菌剂II，优选所述复合菌剂I，糖和氨基酸的质量比为a∶b∶c，其中a选自60-80的数字，b选自15-40的数字，c选自10-30的数字。

3.权利要求1-2任一项所述的微生物菌剂，其特征在于还包含生物炭，优选所述生物炭来自植物，更优选来自松针，更优选其是通过400℃热解松针4～6h，过150～200目筛而制得，进一步优选地，复合菌II占生物炭的质量百分比为6～12％。

4.制备权利要求3所述微生物菌剂的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将腐殖质呼吸菌与益生菌培养至对数生长期，后混合均匀，得到复合菌剂I。

(2)将步骤(1)所得复合菌剂I冻干后与生物活性物质混合，得到复合菌剂II。

(3)将步骤(2)所得复合菌剂II，与生物炭混合固定。

5.权利要求4的制备方法，其特征在于腐殖质呼吸菌及厌氧氨氧化布罗卡德氏菌的培养条件为35～38℃，厌氧条件；枯草芽孢杆菌的培养条件为35～38℃，好氧条件。

6.权利要求4-5任一项所述的制备方法，其特征在于所述对数生长期是指菌液在600nm波长处的光密度值(OD₆₀₀)范围为0.5～0.9。

7.权利要求4-5任一项所述的制备方法，其特征在于所述生物炭的制备方法为：400℃热解松针4～6h，过150～200目筛。

8.权利要求4-5任一项所述的制备方法，其特征在于所述固定方法为：

将生物炭(优选1～1.2g)加入100mL固定化培养基，灭菌后，加入质量比为6～12％的复合菌剂II，温度为35～38℃，固定时间为16～20h。

9.权利要求1-3任一项所述的微生物菌剂在促进土壤重金属污染修复(优选降低土壤重金属含量)中的应用。

10.权利要求9所述的应用，其中所述重金属选自Cd、Cr、U、Cu、Pb、Hg、Zn及组合。