[发明专利]一种用于抗抑郁药物用药指导的多重基因检测试剂盒及其使用方法

说明书

本发明公开了一种用于抗抑郁药物用药指导的多重基因检测试剂盒及其使用方法。本发明采用多重PCR结合片段长短/质量分析方法，同步快速定性检测与抗抑郁药物代谢、转运、靶点作用相关的CYP2D6、CYP2C19、ABCB1和FKBP5等4个基因上7个单核苷酸多态性(SNP)位点。检测步骤：(1)采集口腔脱落细胞保存于细胞采集卡，或采集血液样本并提取核酸；(2)采用步骤1所述细胞采集卡或核酸为模板进行多重PCR扩增；(3)按PCR产物片段长短/质量同步分离7个SNP位点、3个人类DNA内参基因及1个PCR反应内参的PCR产物；(4)结果分析判读。本发明的优势是快速、灵敏度高、重复性好、特异性强、通量高、成本低。

技术领域

本发明涉及一种多重基因检测试剂盒，具体涉及一种用于抗抑郁药物用药指导的多重基因检测试剂盒及其使用方法。

背景技术

抑郁症(depression)是一种常见的可终身罹患的情感障碍性疾病，发生于各个年龄阶段，呈反复发作、间歇期完好状态的特点。世界卫生组织(WHO)公布的资料显示，抑郁症发病率呈逐年上升的趋势，全球抑郁症患者超过3亿，其中重度抑郁症患者已有8900万人。全球每年约80万因抑郁症自杀，自杀已成为15～29岁年龄组人群的第二死亡原因。WHO于2001年的健康报告中指出，抑郁症在全球疾病负担中所占比例最大(11.9％)，远超过糖尿病和高血压等慢性病。预计到2020年，重度抑郁所致功能残疾将升至疾病总类的第2位，仅次于缺血性心脏病。

服用药物是治疗抑郁症的主要手段。抗抑郁药物物主要有单胺氧化酶抑制剂(MAOI)、三环类(TCAs)抗抑郁药物和选择性5-羟色胺(5-HT)回收抑制剂三大类。随着制药行业的发展，如万拉法星、萘法唑酮等新药层出不穷，但目前临床应用最多的仍是三环类(TCAs)抗抑郁药物和选择性5-羟色胺(5-HT)回收抑制剂。尽管目前药物是治疗抑郁障碍最有效的方法，但是仍然存在药物有效率低和不良反应严重等问题。研究表明，单一抗抑郁药物治疗抑郁障碍，即使在足量足疗程的给药条件下，仅30～45％的患者获得临床症状的完全缓解，且症状缓解存在延迟反应；有10％的患者对于任何种类的抗抑郁药物物治疗均无效。

近年来，随着药物基因组学飞速发展，抗抑郁药物物尤其是三环类(TCAs)抗抑郁药物和选择性5-羟色胺(5-HT)回收抑制剂的药物作用机制越来越明确。药物基因组研究显示，药物个体差异大的最主要原因是遗传差异，即不同患者之间存在基因多态性。人类基因组80％以上基因多态性都是单核苷酸多态性(Single Nucleotide polymorphism，SNP)。SNP指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性，包括碱基转换、颠换、缺失和插入。大部分抗抑郁药物物都经CYP2D6或CYP2C19代谢。药物代谢酶基因SNP位点发生突变可使酶活性发生变化，导致药物前体或中间活性产物浓度过高或过低，从而使患者疗效不佳，甚至发生严重毒副反应。与药物转运和药物靶点作用相关的SNP位点发生突变也对药物反应有重要影响。目前，神经精神药理学药物监测治疗共识指南(2017)和pharmGKB数据库已公布了部分抗抑郁药物物的代谢、转运和靶点基因。通过对药物代谢、转运和靶点相关的SNP位点进行检测，可判断患者对不同药物的反应，为患者量身定制一套用药方案，提高治疗效率，减轻患者医疗负担和痛苦，节省大量医院及社会资源(见表1)。

表1抗抑郁药物用药指导相关基因

目前市场上，SNP分型检测技术主要有三种：测序法、荧光定量PCR法、基因芯片法：

(1)荧光定量PCR法

荧光定量PCR采用荧光淬灭及双末端标记技术，针对SNP位点设计特异性的探针，具有灵敏度高、准确性高和特异性高等优势。但荧光定量PCR通量低，若要同时检测多个SNP位点，需要分管检测，操作复杂，样品用量大，难以适应临床需求。此外，荧光定量PCR难以设置内参质控，无法避免假阳性和假阴性。

(2)基因芯片法