[发明专利]一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒及其使用方法在审
| 申请号： | 201910212576.7 | 申请日： | 2019-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN109825574A | 公开（公告）日： | 2019-05-31 |
| 发明（设计）人： | 吕军英;王凡;吴勇;余丁 | 申请（专利权）人： | 宁波海尔施基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883 |
| 代理公司： | 余姚德盛专利代理事务所(普通合伙) 33239 | 代理人： | 吴晓微 |
| 地址： | 315040 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 抗癫痫药物 多重基因 检测试剂 细胞采集 用药指导 内参 单核苷酸多态性 采集血液样本 口腔脱落细胞 多重PCR扩增 个人基因组 定性检测 结果分析 结合片段 特异性强 提取核酸 同步分离 质量分析 多重PCR 灵敏度 基因 核酸 靶点 判读 通量 位点 转运 代谢 采集 保存 检测 | ||
1.一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒，其特征在于，包括如下表所示的同步快速定性检测与抗癫痫药物用药相关的8个SNP位点和4个内参基因的引物组合物：SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.32、PCR反应液、阳性对照品和超纯水；所述8个SNP位点为：CYP2C19基因的*2、*3和*17位点，CYP2C9基因的*2和*3位点，UGT1A4基因的rs2011425位点，POLG基因的A467T和W748S位点；
2.如权利要求1所述的一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒，其特征在于，针对每一个SNP位点设计了3条引物，其中2条引物分别与野生型基因和突变型基因互补结合，1条共用的引物分别与野生型和突变型引物形成引物对扩增出片段长短有2～10个碱基差异的PCR产物。
3.如权利要求1所述的一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒，其特征在于，在多重PCR反应中加入3个人基因组DNA内参和一个PCR反应内参。
4.如权利要求1所述的一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒，其特征在于，所述阳性对照品包括所述8个SNP位点和所述4个内参基因所对应的质粒混合物。
5.如权利要求1所述的一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液包括以下组分：超纯水、2×PCR缓冲液、DNA聚合酶和dNTP。
6.一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)采集口腔脱落细胞保存于细胞采集卡，或采集血液样本并提取核酸；(2)采用步骤1所述细胞采集卡或核酸为模板进行多重PCR扩增；(3)按PCR产物片段长短/质量同步分离8个SNP位点及4个内参；(4)结果分析判读。
7.如权利要求6所述一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒的使用方法，其特征在于，所述口腔脱落细胞保存于细胞采集卡上，可不需要核酸提取，直接用于PCR扩增。
8.如权利要求6所述一种用于抗癫痫药物用药指导的多重基因检测试剂盒的使用方法，其特征在于，所述PCR反应条件为：95℃5min；94℃10s，61℃1min；70℃30s，循环29次；60℃15min；4℃直至收取PCR产物。
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