[发明专利]一种黑青稞专用复合微生物肥料的制备方法及应用

权利要求书

1.一种黑青稞专用复合微生物肥料，其特征在于，按重量百分比计原料组成如下：腐殖土35％，珍珠岩10％，草炭土35％，复合微生物菌粉20％。

2.根据权利要求1所述的黑青稞专用复合微生物肥料，其特征在于，复合微生物菌粉的活菌数为6-8亿/克，复合微生物菌粉由3种细菌组成：叶球形微杆菌、氧化微杆菌和鞘氨醇杆菌，3种细菌活菌数比例为：1：1：1。

3.一种黑青稞专用复合微生物肥料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、菌株活化将4℃下斜面保存的菌株置于28℃下活化培养1～2h，后将各供试菌株划线接种于LB固体平板培养基，上，每菌株接种3皿，28℃下培养24h；待各菌株充分生长后，挑取典型单菌落，划线接种到LB固体斜面上，保存备用；

步骤2、菌株拮抗反应测试

分别将LB固体平板培养基中活化的菌株HQ7-4固氮菌株、LQ14-2溶磷菌株、SR6-1分泌IAA菌株划线接种到盛有LB固体培养基的同一培养皿中，置于28℃～30℃培养箱中，培养4～8d，并定期观察细菌交叉点的细菌生长情况，判定其有无抑制作用；若该交叉点细菌不生长或生长差，说明这两种细菌共存时有拮抗作用；反之，若该交叉点细菌生长良好，说明这两种细菌能共存，其间没有抑制作用；将相互之间不发生拮抗反应的各个菌株悬浮液混合，否则单独使用；

步骤3、菌粉制作分别接种3株菌于LB液体培养基中，于28℃、125rpm下培养48h；待菌株充分生长后，利用紫外分光光度计测定各菌株悬浮液OD值；当OD值大于0.5时调其OD值相等，并将菌株HQ7-4固氮菌株、LQ14-2溶磷菌株、SR6-1分泌IAA菌株悬浮液等体积混合，置于培养箱中充分生长后低温烘干即能用于复合菌肥的制作；

步骤4、固体菌肥制作

将腐殖土35％，珍珠岩10％，草炭土35％，混匀后灭菌1～2h，分装成500g小袋，接种20％到步骤3制作的菌粉，将腐殖土、珍珠岩和草炭土和菌粉充分混匀，常温下保存。

4.根据权利要求3所述的黑青稞专用复合微生物肥料的制备方法，其特征在于，步骤1中所述LB固体平板培养基的成分具体为：蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠5-10g，琼脂20g，pH7.0，总体积1000mL。

5.根据权利要求3所述的黑青稞专用复合微生物肥料的制备方法，其特征在于，步骤3中，所述LB液体培养基的成分具体为：蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠5-10g，pH7.0，总体积1000mL。

6.权利要求1所述黑青稞专用复合微生物肥料在黑青稞种植中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，将制得的黑青稞专用复合微生物肥与黑青稞种子按1：1拌种播于试验田。