[发明专利]一种酮还原酶多肽及其催化制备(S)-1-(2-碘-5-氟苯基)乙醇的方法

说明书

本发明涉及一种酮还原酶多肽及其催化制备(S)‑1‑(2‑碘‑5‑氟苯基)乙醇的方法，属于基因工程技术用于制备医药中间体领域。该种酮还原酶能够转化的底物1‑(5‑氟‑2‑碘苯基)乙酮浓度达到200g/L以上，并且产物(S)‑1‑(2‑碘‑5‑氟苯基)乙醇的手性纯度能够达到99％以上，同时底物转化率在99％以上，且在转化过程中未用到有机溶剂。本方案能够使得底物完全、高效的转化成为目标产物，并且所制备的产物分离提纯简单，后处理成本低，整个工艺流程环境友好度高，原子利用率高。

技术领域

本发明涉及一种医药中间体制备方法，尤其涉及酮还原酶多肽及其催化制备(S)-1-(2-碘-5-氟苯基)乙醇的方法

背景技术

劳拉替尼(Lorlatinib，CAS号：1454846-35-5)，结构式如式I，是辉瑞公司开发的一种新型、可逆、强效的小分子ALK和ROS1抑制剂，其对ALK已知的耐药突变均具有很强的抑制作用，因而被誉为第3代ALK抑制剂。于2018年11月2日被FDA批准上市，用于治疗ALK阳性的非小细胞肺癌。

(S)-1-(2-碘-5-氟苯基)乙醇(CAS号：1454847-96-1)，结构式如式II，是合成劳拉替尼的重要中间体。

目前合成(S)-1-(2-碘-5-氟苯基)乙醇的主要方法为化学法。

专利WO2017148325公开一种化学合成方法，以1-(5-氟-2-碘苯基)乙酮为原料，使用NaBH₄作为催化还原剂，收率可达99％，但是易燃有毒，不适于工业化生产。

专利WO2014207606和CN104169286公开一种化学合成方法，以1-(5-氟-2-碘苯基)乙酮为原料，采用(-)DIPCl作为催化还原剂，需要将反应液冷却至-20℃至-30℃，且操作过程繁琐，收率仅为80％。

文献Organic Process ResearchDevelopment,21(9),1340-1348；2017报道了采用2,4-二酮葡萄糖酸(DkgA)酶制备(S)-1-(2-碘-5-氟苯基)乙醇的方法，该酶转化底物的浓度仅为66g/L,且该工艺采用了价格相对昂贵的辅酶NADPH，其用量达到底物重量的5％-10％，该方法底物浓度较低，生产成本较高。

因此，需要开发一种新的环境友好、收率高且适于工业化应用的技术制备高光学纯度的(S)-1-(2-碘-5-氟苯基)乙醇的方法，以满足药物研发与生产方面的市场需求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种催化1-(5-氟-2-碘苯基)乙酮转换为(S)-1-(2-碘-5-氟苯基)乙醇的酮还原酶多肽；

本发明的另一个目的在于提供上述酮还原酶多肽的氨基酸序列；

本发明的另一个目的在于提供基因序列，此基因序列能够编码上述氨基酸序列的酮还原酶；

本发明的最终目的在于运用所制备的酮还原酶催化1-(5-氟-2-碘苯基)乙酮转换为(S)-1-(2-碘-5-氟苯基)乙醇，提高合成效率。

本发明技术方案采用如下路线：

路线中所采用的酮还原酶多肽(KRED)为SEQ ID No.1-10所记载的氨基酸序列；

进一步，上述酮还原酶多肽以酮还原酶酶粉、酮还原酶酶液、含酮还原酶的细胞等形式参与催化反应，用于催化1-(5-氟-2-碘苯基)乙酮为(S)-1-(2-碘-5-氟苯基)乙醇。