[发明专利]一种细胞保存液及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种细胞保存液，含有以下组分：Na₂HPO₄、葡萄糖、柠檬酸、腺嘌呤、NaCl及水。本发明还提供了上述细胞保护液的制备方法和应用。本发明所提供的细胞保存液，可以长期保存骨髓、外周血、组织等，并保证免疫分型、淋巴细胞亚群检测等多种白细胞相关检测结果的稳定和正确，特别适用于流式细胞检测。并且使用保存液保存的细胞依旧保持活性，可继续进行细胞培养和死活染料标记。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体而言，涉及一种细胞保存液及其制备方法和应用。

背景技术

随着科学技术的发展及各医学领域对细胞的深入研究，流式细胞术作为一项常规的检测技术应用在各个领域，在科学研究及临床诊断方面处于越来越重要的地位。包括本申请人之前申请的申请号为20161002721.4和201610768294.1的中国发明专利申请在内的许多现有技术着重对流式细胞术本身的步骤和参数进行了研究。然而，目前对于流式细胞术样本的保存，却没有一种公认的简单快捷的保存方法或产品。

为了保证流式细胞术检测结果的准确性，细胞样本应尽可能保证新鲜，即使于2-8℃条件下保存，也应尽快使用，以免样本失活导致结果偏差。

在本申请人之前申请的申请号为201610768294.1的中国发明专利申请公开了一种细胞保存液，专用于流式细胞术样本的保存，可长时间保持样本的稳定性，对于外周血样本，可稳定白细胞分群及表面抗原的表达。上述专利申请所衍生的产品对细胞具有固定作用，经过保存液保存后的细胞样本，无活性，无法继续进行培养或死活细胞鉴别。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种细胞保存液及其制备方法和应用。

为了达成上述的目的，本发明提供一种细胞保存液，含有以下组分：Na₂HPO₄、葡萄糖、柠檬酸、腺嘌呤、NaCl及水。

作为优选，其中所述水为纯水。

作为优选，其中所述细胞保存液含有以下终浓度的组分：

Na₂HPO₄0.1-10g/L；

葡萄糖0.1-50g/L；

柠檬酸0.1-10g/L；

腺嘌呤0.1-10g/L；

NaCl 0.01-500mmol/L；

上述各组分的溶剂均为水。

所述细胞保存液没有腐蚀性，也没有氧化性，可以装于多种材质的容器，如玻璃容器或塑料容器。

本发明提供了上述保存液的制备方法，包括如下步骤：将Na₂HPO₄、葡萄糖、柠檬酸、腺嘌呤、NaCl与混合均匀，即得。

作为优选，其中所述制备方法还包括混合后进行过滤和/或分装的步骤。通常可以不分装，直接装于大试剂瓶中储存；对于硬连接采血方式采血样本的保存，优选分装成管装的保存液，这样可以直接向管内加入采集的血液或含细胞的样本而进行保存。分装可以分装在非真空管中，也可以分装在真空管中。鉴于通常血液样本的采集体积为1～2ml，因此分装的体积对应为100～300μl/管，优选为250μl/管。

本发明进一步提供了上述细胞保存液在用于流式细胞仪检测中的应用。

作为优选，其中所述应用包括以下步骤：

1)提供含有细胞的样本液；

2)将上述细胞保存液与所述样本液混合，其中所述细胞保存液与所述样本液的体积比为1:5～1:10；