[发明专利]一种微生物菌肥及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种微生物菌肥，其特征在于，由枯草芽孢杆菌和洋葱伯克霍尔德氏菌按照(1～3)∶(1～3)复配而成；所述枯草芽胞杆菌和洋葱伯克霍尔德氏菌的菌液浓度均为5x10⁸cfu/ml。

2.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)制备枯草芽孢杆菌和洋葱伯克霍尔德氏菌菌液：

a、菌种培养：将保存的枯草芽孢杆菌和洋葱伯克霍尔德氏菌分别转接在新鲜配制的固体培养基摆成的试管斜面上，于30～37℃培养15～20h，取此斜面菌种转接含有液体培养基的摇瓶培养，于30～37℃培养24～36h；

b、种子罐培养：在种子罐中加入液体培养基，装液量为30％～60％，调节pH至6.6～7.8，121℃灭菌20～30min，开冷却水降温，并通无菌空气控制罐压为0.04～0.06MPa，当温度降至30～37℃时，将摇瓶中的菌体用100～200ml无菌生理盐水清洗，接种至种子罐内的液体培养基中，保持30～37℃、罐压0.04～0.06MPa，进行深层通气搅拌培养16～24h；

c、发酵罐培养：将种子罐中的培养液以5％～10％的接种量转入1m³发酵罐的液体培养基中，保持30～37℃、罐压0.04～0.06MPa，进行深层通气搅拌培养24～30h，使枯草芽胞杆菌和洋葱伯克霍尔德氏菌的菌液浓度达到5x10⁸cfu/ml；

(2)枯草芽孢杆菌与洋葱伯克霍尔德氏菌菌液混合：

将步骤(1)制备的枯草芽孢杆菌与洋葱伯克霍尔德氏菌菌液按体积比(1～3)∶(1～3)混合均匀，即得微生物菌肥。

3.根据权利要求2所述的一种微生物菌肥的制备方法，其特征在于，所述固体培养基的配方为：蛋白胨10g，牛肉膏7g，氯化钠7g，蒸馏水定容至1000ml，调节pH 7.2～7.4，加入18～20g琼脂。

4.根据权利要求2所述的一种微生物菌肥的制备方法，其特征在于，所述液体培养基的配方为：蛋白胨20g，酵母膏5g，磷酸氢二钾0.2g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.1g，葡萄糖8g，碳酸钙10g，蒸馏水定容至1000ml。

5.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥，在防治柿树炭疽病中的应用。