[发明专利]一种高产洛伐他汀菌的发酵方法

说明书

发明公开了一种高产洛伐他汀菌的发酵方法，具体包括种瓶制备，取种瓶培养基加一定量蒸馏水溶解并利用20%氢氧化钾调节pH至7.4；随后加甘油并在121℃环境下灭菌30分钟，备用；随后选取合适的单菌落加适量生理盐水并用玻璃棒混合搅拌制备悬菌液，随后取一定量悬菌液接种至种瓶内，并在28℃环境下以及在250rpm的摇床上培养34h，本发明原有配方进行了优化调整，最后发酵水平可达15g/L，部分批次可达到16g/L，比现有水平提高40‑60%。

技术领域

发明涉及生物领域，尤其是涉及一种高产洛伐他汀菌的发酵方法。

背景技术

洛伐他汀是由土曲霉（Aspexgillus terrrus）发酵而得到，是一种羟甲基戊二酸辅酶A（HMG-CoA）还原酶抑制剂，最早由默克公司在20世纪初从美国的土壤中分离制得，它能显著降低胆固醇，并具有较好的安全性，因而与1987年获得FDA批准上市。

发明内容

本发明旨在提供一种高产洛伐他汀菌的发酵方法。

一种高产洛伐他汀菌的发酵方法，具体包括以下步骤：

S1、种瓶制备，取种瓶培养基加一定量蒸馏水溶解并利用20%氢氧化钾调节pH至7.4；随后加甘油并在121℃环境下灭菌30分钟，备用；

S2、选取合适的单菌落加适量生理盐水并用玻璃棒混合搅拌制备悬菌液，随后取一定量悬菌液接种至种瓶内，并在28℃环境下以及在250rpm的摇床上培养34h；

S3、发酵瓶制备，取发酵瓶培养基加一定量蒸馏水溶解并利用20%氢氧化钾调节pH至7.2；随后加甘油、豆油以及PEG-400并在121℃环境下灭菌30分钟，备用；

S4、将步骤S2培养得到的菌落转种至发酵瓶中，并在28℃环境下以及在250rpm摇床上培养8-10天。

作为发明进一步的方案：所述种瓶培养基按重量百分比计包括以下组分，葡萄糖、蔗糖、奶粉、大豆粉、酵母提取物、柠檬酸、醋酸钠、7水硫酸镁、磷酸氢二钾、PEG-400、碳酸钙。

作为发明进一步的方案：所述发酵棚培养基按重量百分比计包括以下组分，葡萄糖、 柠檬酸、奶粉 、醋酸钠、大豆粉 、 7水硫酸镁、酵母提取物 、蛋白胨、 碳酸钙。

发明的有益效果：本发明原有配方进行了优化调整，最后发酵水平可达15g/L，部分批次可达到16g/L，比现有水平提高40-60%。

发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过发明的实践了解到。

具体实施方式

发明实施例中，一种高产洛伐他汀菌的发酵方法，具体包括以下步骤：

S1、种瓶制备，取葡萄糖、蔗糖、奶粉、大豆粉、酵母提取物、柠檬酸、醋酸钠、7水硫酸镁、磷酸氢二钾、PEG-400混合后加碳酸钙，加一定量蒸馏水溶解并利用20%氢氧化钾调节pH至7.4；随后加甘油并在121℃环境下灭菌30分钟，备用；

S2、选取合适的单菌落加适量生理盐水并用玻璃棒混合搅拌制备悬菌液，随后取一定量悬菌液接种至种瓶内，并在28℃环境下以及在250rpm的摇床上培养34h；

S3、发酵瓶制备，取葡萄糖、 柠檬酸、奶粉 、醋酸钠、大豆粉、 7水硫酸镁、酵母提取物、蛋白胨混合后加 碳酸钙；加一定量蒸馏水溶解并利用20%氢氧化钾调节pH至7.2；随后加甘油、豆油以及PEG-400并在121℃环境下灭菌30分钟，备用；

S4、将步骤S2培养得到的菌落转种至发酵瓶中，并在28℃环境下以及在250rpm摇床上培养8-10天。

具体培养结果见表1，发酵水平平均可达15g/L，部分批次可达到16g/L