[发明专利]一种0.5%鬼臼毒素酊的制备方法在审
申请号: | 201910218421.4 | 申请日: | 2019-03-21 |
公开(公告)号: | CN109745286A | 公开(公告)日: | 2019-05-14 |
发明(设计)人: | 栗孟飞;刘孜瀚;胡贝;吕敏;曹小路;孙萍;张真;幸华 | 申请(专利权)人: | 甘肃百草生物科技有限公司 |
主分类号: | A61K9/08 | 分类号: | A61K9/08;A61K31/365;A61K47/10;A61P31/20;G01N30/02;C07D493/04 |
代理公司: | 甘肃省知识产权事务中心 62100 | 代理人: | 马英 |
地址: | 730070 *** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鬼臼毒素酊 鬼臼毒素 制备 提取液 高效液相色谱检测 微孔滤膜过滤 乙酸乙酯萃取 萃取液浓缩 快速制备 浓度标定 无水乙醇 乙醇溶解 根茎 标准品 料液比 浓缩液 上清液 桃儿七 萃取液 风干 标定 振荡 采挖 可用 振速 萃取 清洗 简易 浓缩 检测 重复 | ||
1.一种0.5%鬼臼毒素酊的制备方法,其特征在于:按下述步骤完成:
A材料的采集与处理
待秋季桃儿七地上部分开始枯萎时,采挖具备繁殖能力且5年以上的地下根及根茎,流水冲洗干净后,置于自然光下、通风处干燥;
B提取溶剂的制备
将干燥的根及根茎粉碎后过0.18 mm筛,置于无水乙醇中按照料液比g:mL 为1:10,室温120 r/min旋转振荡提取24 h;然后在4℃、5000 r/min条件下离心10 min,收集上清液;重复上述提取步骤3次,合并3次上清液;
C鬼臼毒素的萃取
上清液在70℃下减压浓缩至小体积,用纯净水将浓缩液全部溶解;然后用1:1(v/v)乙酸乙酯萃取,收集萃取液;重复上述萃取步骤3次,合并3次萃取液;D萃取液的浓缩
萃取液在60℃下减压浓缩至小体积,然后用70%乙醇将浓缩液全部溶解;
E鬼臼毒素的标定
将浓缩的70%乙醇溶解的鬼臼毒素酊,用0.22 μm孔径的微孔滤膜进行过滤,然后在230nm 下进行高效液相色谱检测;以鬼臼毒素标准品进行标定,根据检测结果,将鬼臼毒素酊的浓度控制在0.5%±0.005%。
2.根据权利要求1所述的一种0.5%鬼臼毒素酊的制备方法,其特征在于:步骤E中高效液相色谱检测条件是:柱型:C18,250 mm×4.6 mm,5 μm;流动相:乙腈:H2O:甲醇 = 37:58:5 (v/v/v);流速:1.0 ml/min。
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