[发明专利]促进白及假鳞茎增殖/膨大的方法

说明书

本发明公开了一种促进白及假鳞茎增殖/膨大的方法，包括以下步骤：割取白及组培苗单株；将所得的单株于无菌条件下接种至增殖/膨大培养基进行培养，增殖/膨大培养基由1/2MS培养基、6‑BA、NAA、土豆、琼脂、蔗糖、花宝组成，花宝为以下任一：花宝1号、花宝4号、花宝5号。本发明的促进白及假鳞茎增殖/膨大方法，可以短时间内促进白及假鳞茎增殖/膨大，从而实现短期培养优质种苗的目的。

技术领域

本发明涉及一种促进白及假鳞茎膨大的方法。

背景技术

白及Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.为兰科白及属多年生草本植物，别名甘根，白鸡儿，连及草等。以其干燥块茎入药，味苦、甘、涩，微寒，归肺、肝、胃经。白及主要含黏胶质、多糖类、菲衍生物等成分，中医对白及有“收敛止血，消肿生肌”之说。现代医学证明，白及有抗菌、止血、促进创伤愈合、免疫、保护胃黏膜、抗胃溃疡、抗肿瘤等作用。

近年来，随着我国中医药事业的发展，白及在临床上的应用不断扩大，用药需求急剧增加，而过度采挖和生境破坏却导致白及野生资源量急剧下降，所以白及的价格总体呈逐年上涨的趋势。在市场需求日渐升温的情况下，白及资源的大量减少更凸显了保护白及野生资源及发展人工栽培白及技术的重要性。

白及虽然能产生大量的种子，但是其种子细小且没有胚乳，自然状态下需与真菌共生才能萌发，实生苗的栽培较为困难，目前市场上白及人工栽培主要依靠分株繁殖，这种方式不仅周期长，技术不成熟，而且品种容易感病退化，很难满足大量栽培的需要。

因此，促使白及幼苗假鳞茎增殖/膨大，提高产量，对于规模化种植白及具有重要意义。采用组织培养法可以促进白及假鳞茎的膨大，是提高白及产量较为有效的方法，不仅有利于保护白及野生资源，还可有效改善白及种源品质，为白及的产业化发展奠定基础。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种促进白及假鳞茎膨大/增殖的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种促进白及假鳞茎增殖/膨大的方法，包括以下步骤：

1)、割取白及组培苗单株；

2)、将步骤1)所得的单株于无菌条件下接种至增殖/膨大培养基中，于(25±3)℃的培养温度，光照12h/12h暗培养的条件下培养150±5天，光照强度为25～30μmol m^-2·s^-1；

所述增殖/膨大培养基为：1/2MS培养基(即溶液中所有物质的含量为MS基本培养基的一半)+6-BA(1.0±0.1)mg/L+NAA(0.2±0.02)mg/L+土豆(100±10)g/L+琼脂(7±0.5)g/L+蔗糖(30±0.5)g/L+花宝1～5g；pH调节至5.8±0.2；

所述花宝为以下任一：花宝1号、花宝4号、花宝5号。

增殖/膨大培养基的制备方法为：

以1/2MS基本培养基(即溶液中所有物质的含量为MS基本培养基的一半)为基础，每1L的1/2MS基本培养基中加分别加入6-苄基嘌呤(6-BA)(1.0±0.1)mg、萘乙酸(NAA)(0.2±0.02)mg、土豆泥(100±10)g、琼脂(7±0.5)g、蔗糖(30±0.5)g、花宝1～5g均匀混合，pH调节至5.8±0.2。

土豆泥的制备方法为：马铃薯先洗净去皮，切成小块，称取100±10g的马铃薯小块加水煮烂(煮沸20～30分钟，能被玻璃棒戳破即可)，用2层纱布过滤，所得的滤饼为土豆泥。

作为本发明的促进白及假鳞茎增殖/膨大的方法的改进：接种时，控制增殖/膨大培养基上的白及苗之间的间距为2～3cm。