[发明专利]一种制备屈西多巴的方法

说明书

本发明公开了一种制备屈西多巴的方法，其特征在于，以3，4‑二羟基苯甲醛和L‑苏氨酸为原料，在转醛酶存在下，合成屈西多巴。

技术领域

本发明涉及一种制备屈西多巴的方法，属于生物制药和生物化工的技术领域。

背景技术

屈西多巴是一种新的抗帕金森药物。可治疗去甲肾上腺素缺乏引起的各种症状,如帕金森患者的步态僵直,直立性低血压所致头昏及乏力等。其在生物医药领域应用非常广泛，因此探索一种温和、高效、经济的方法制备屈西多巴受到了广大化学生物工作者的关注。

屈西多巴的结构式如下所示：：

目前制备屈西多巴主要有以下的方法：以3，4-二羟基苯甲醛为起始原料，通过多步化学反应制备(专利US3920728；EP0024210A1；Chinese Journal of SyntheticChemistry,2010,18,124-127等)，流程如下所示：

此方法需要手性拆分并且需要用到苄基的保护-脱保护，原子经济性较差并且反应步骤的增加使得整体的收率降低，导致了整条路线的收率低于20％；同时也对工业化生产增加了难度。

生物工作者对此化合物的制备也做了一些尝试，(BiotechnologyLetters,2010,32,143-149)报道了利用L-苏氨酸醛缩酶催化对3，4-二羟基苯甲醛和甘氨酸的缩合反应，反应式如下：

此方法具有以下优点：路线短，反应温和，成本低等。但是，此方法还存在转化率低、甘氨酸用量大、立体选择性差、产品的分离纯化难度大等缺陷，还不具备产业化的条件。

因此，探索一种温和、高效、经济、对环境友好的屈西多巴制备方法是非常有意义的。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供了一种简单易行的合成屈西多巴的新方法，该方法操作简单，条件温和，大幅度降低了生产的成本，适合大规模的工业化生产。

本发明的提供一种从廉价易得的3，4-二羟基苯甲醛和L-苏氨酸在转醛酶的作用下制备屈西多巴，合成路径如下所示：

因此，本发明提供一种制备屈西多巴的方法，其特征在于，以3，4-二羟基苯甲醛和L-苏氨酸为原料，在转醛酶存在下，合成屈西多巴。

优选地，酶反应过程中，添加磷酸吡哆醛作为辅酶。

优选地，酶反应在磷酸缓冲液中进行。

进一步的，本发明发现，酶反应的底物3，4-二羟基苯甲醛在空气中容易被氧化，因此，可选的将反应体系置于惰性气体氛围中，以及可选的向反应体系中加入抗氧化剂；

优选地，所述惰性气体选自：氦气、氖气、氩气、氮气中的一种或多种；

优选地，所述抗氧化剂选自：亚硫酸氢钠、巯基乙醇和抗坏血酸中的一种或多种；

进一步的，本发明发现，转醛酶催化制备屈西多巴的过程中,体系会释放出一分子乙醛，随着反应的进行，乙醛量的累积会导致转醛酶的失活，从而使得转醛酶的用量比较大，并且反应的转化率较低。

本发明进一步优选，在酶反应过程中添加乙醛还原酶使乙醛还原为乙醇；

进一步的，本发明所述的乙醛还原为乙醇的体系以烟酰胺腺嘌呤双核苷酸(NAD)作为辅酶；反应流程如下所示：

优选的，添加葡萄糖和葡萄糖脱氢酶实现辅酶NAD的再生，再生过程如下所示：