[发明专利]以人ADRB1基因1165位点GG型为模板的阳性参考品

说明书

以人ADRB1基因1165位点GG型为模板的阳性参考品，其特征在于：所述阳性参考品是一种以碱基序列为主要成分的试剂，该碱基序列包含人ADRB1基因片段，所述人ADRB1基因片段如SEQ NO:4所示，其中，带有下划线的碱基位点是人ADRB1基因的1165位点，所述1165位点用于表征人ADRB1基因的GG型可突变为人ADRB1基因的CC型的位置。本发明用于验证被检样本中是否含有人ADRB1基因1165位点GG型这一检测结果是否准确，解决了人ADRB1基因的质量检测问题。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种以人ADRB1基因1165位点GG型为模板的阳性参考品，该阳性参考品用于验证ADRB1基因型检测试剂盒在应用于样本检测时样本是否为阳性的辅助判断。

背景技术

质控品是指用于体外诊断的质量控制物质，其具有已知浓度含量的目标检测物，为使人们确信某一产品或服务质量能满足规定的质量要求所必须的产品。质控品的使用目的是为了验证整个PCR反应过程具有准确性、有效性和特异性，并监控检测系统的状态。仪器在正式投入使用后，应定期对其校准，避免由于仪器原因导致的实验偏差。再次，在收到每批新试剂后，应首先对其进行预实验，确证新试剂质量后，再用于对临床标本的检测。

但是据申请人了解，目前在检测人ADRB1基因1165位点GG型质量控制方面没有阳性参考品。

发明内容

本发明旨在提供一种以人ADRB1基因1165位点GG型为模板的阳性参考品，用于验证被检样本中是否含有人ADRB1基因1165位点GG型这一检测结果是否准确，解决了人ADRB1基因的质量检测问题。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种以人ADRB1基因1165位点GG型为模板的阳性参考品，该阳性参考品是一种以碱基序列为主要成分的试剂，该碱基序列包含人ADRB1基因片段，所述人ADRB1基因片段为5’-GGCGGGCCCTCGCGCCTCGTGGCCCTGCGCGAGCAGAAGGCGCTCAGGACGCTGGGCATCATCATGGGCGTCTTCACGCTGTGCTGGCTGCCCTTCTTCCTGGCCAACGTGGTGAAGGCCTTCCACCGCGAGCTGGTGCCCGACCGCCTCTTCGTCTTCT-3’，其中，带有下划线的碱基位点是人ADRB1基因的1165位点，所述1165位点用于表征人ADRB1基因的GG型可突变为人ADRB1基因的CC型的位置。

上述技术方案中的有关内容解释如下：

1、上述方案中，所述阳性参考品中还含有缓冲试剂，该缓冲试剂选自pH7.6的Tris-HCl缓冲液或pH7.6的TE缓冲液。

2、上述方案中，所述阳性参考品中含有的人ADRB1基因序列是构建到质粒载体上保存，根据现有技术即可得到，质粒构建过程如下：

引物设计——PCR扩增——割胶回收DNA片段——构建载体——转化培养——阳性克隆鉴定——37℃摇床培养——质粒抽提——测序确认碱基序列。

抽提后的质粒再配制成所述阳性参考品，配制方法如下：

（1）配制稀释液：加入50%配方量的纯化水→加入Tris-HCl缓冲液（pH7.6）→加入剩余的纯化水（涡旋震荡3次，每次5秒）→得0.002mol/L的Tris-HCl（pH 7.6）稀释液；

（2）人ADRB1基因1165位点GG纯合载体质粒预稀释：加入50%配方量的所述稀释液→加入人ADRB1基因1165位点GG纯合载体质粒溶液→加入剩余的所述稀释液（涡旋震荡3次，每次5秒）→得到X拷贝/微升人ADRB1基因1165位点GG纯合质粒溶液（X代表质粒浓度的具体数值）；