[发明专利]用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒

说明书

本发明公开一种用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒，有捕获试剂、检测试剂、包被缓冲液、洗涤液、显色试剂及终止试剂，其特征在于所述捕获试剂为抗Neu5Gc一抗，所述检测试剂为抗Neu5Gc二抗。灵敏度高，即具有尿液脱落细胞学检查的优点，又克服了尿液脱落细胞学检查灵敏度低的问题，可用于对尿路上皮癌的早期筛查。

技术领域

本发明属于癌症早期诊断领域，尤其是一种灵敏度高的用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒。

背景技术

癌症是严重危害人民身体健康的常见病之一。癌症早期阶段病人几乎没有任何明显症状，当病人有自觉症状到医院就诊时，往往癌症已发展到了中、晚期，导致很多癌症患者因错过了治疗良机而死亡。

尿路上皮癌包括肾盂癌、膀胱癌、输尿管癌等，目前临床上最常用的检查方法为尿液脱落细胞学检查和膀胱镜检查。尿液脱落细胞学检查采用试剂盒进行，操作方便、病人痛苦少，缺点是敏感性较低且受主观因素影响较大，故有一定的误诊率（仍有10~40%假阴性）；而膀胱镜检查准确率相对较高，但具有创伤大、患者依从性低的缺点，且难以发现微小肿瘤灶。

N-羟乙酰神经氨酸（Neu5Gc）是在哺乳动物体内表达的一种唾液酸，可参与并调节多种生物进程，但迄今为止并没有以Neu5Gc为标记物诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒的相关报道。

发明内容

本发明是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种灵敏度高的用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒。

本发明的技术解决方案是：一种用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒，有捕获试剂、检测试剂、包被缓冲液、洗涤液、显色试剂及终止试剂，其特征在于所述捕获试剂为抗Neu5Gc一抗，所述检测试剂为抗Neu5Gc二抗。

本发明是以Neu5Gc为标记物诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒，其中的捕获试剂为抗Neu5Gc一抗，检测试剂为抗Neu5Gc二抗，灵敏度高，即具有尿液脱落细胞学检查的优点，又克服了尿液脱落细胞学检查灵敏度低的问题，可用于对尿路上皮癌的早期筛查。

附图说明

图1是本发明实施例的实验结果示意图。

具体实施方式

本发明的用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒，有捕获试剂、检测试剂、包被缓冲液、洗涤液、显色试剂及终止试剂，其特征在于所述捕获试剂为抗Neu5Gc一抗，所述检测试剂为抗Neu5Gc二抗。

其抗Neu5Gc一抗是用Neu5Gc免疫鸡所得到的抗体IgY，抗Neu5Gc二抗是用兔抗鸡所得到的抗体IgG。

实验：

（1）尿液样本的收集：

晨取300 mL尿液标本。

（2）尿蛋白富集方法：

通过过滤泵富集尿总蛋白。

（3）检测

①包被：用包被缓冲液稀释捕获试剂，100 μL/well，4 ℃过夜，次日弃去孔内溶液，用洗涤液洗2次，每次5 min；

②加样：加稀释的尿总蛋白100 μL，置37 ℃孵育1h，弃去孔内溶液，用洗涤液洗2次，每次5 min；

③加酶标抗体：于各反应孔中，加入检测试剂100 μL， 37 ℃孵育1 h，用洗涤液洗2次，每次5 min。

④加显色液：加入现配显色溶液100 μL/well，室温反应10~20 min；

⑤终止反应：与各孔加入终止液100 μL。