[发明专利]具有部分反硝化功能的嗜碱假单胞菌、其培养方法及应用

说明书

一种具有部分反硝化功能的嗜碱假单胞菌、其筛选培养方法及应用，所述嗜碱假单胞菌(Pseudomonas alcaliphila)的保藏号为CGMCC No.17246，所述嗜碱假单胞菌是由城镇污水处理厂筛选出来，可使用LB培养基进行富集。所述嗜碱假单胞菌在以葡萄糖或乙醇为碳源的条件下，可实现反硝化过程中硝酸盐到亚硝酸盐的快速稳定累积，在部分反硝化途径的研究领域有广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及污水处理技术领域，特别是涉及一种具有部分反硝化功能的嗜碱假单胞菌(Pseudomonas alcaliphila，W-39)、其筛选培养方法及应用。

背景技术

以厌氧技术为核心的工艺路线中，COD通过厌氧工艺去除后，以厌氧氨氧化进行脱氮成为低能耗污水处理技术的可行途径。在厌氧氨氧化工艺 (anaerobic ammoniaoxidation，ANAMMOX)中，厌氧氨氧化菌以氨氮为电子供体、亚硝态氮为电子受体，将两者在厌氧条件下转化为氮气和少量硝态氮。获得比例相应的亚硝态氮和解决反应产生的硝酸盐累积是厌氧氨氧化技术工程应用的关键。传统上，通过好氧过程的曝气控制等方法实现部分亚硝化(partial nitritation，PN)来提供亚硝态氮，近年来，反硝化过程中亚硝酸盐累积的现象被发现，并且可以实现亚硝酸盐的稳定维持，这证明了部分反硝化(partialdenitrification，PD)途径能够实现，但是具体如何优化筛选/培养途径，满足不同场景对部分反硝化工艺的调控还需要深入探讨和研究。

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种具有部分反硝化功能的嗜碱假单胞菌，及其筛选和富集的方法和应用，以期至少部分地解决上述技术问题。

为了实现上述目的，作为本发明的第一个方面，提供了一种嗜碱假单胞菌(Pseudomonas alcaliphila)，其特征在于，所述嗜碱假单胞菌的保藏编号为CGMCCNo.17246。

作为本发明的第二个方面，提供了一种嗜碱假单胞菌，其特征在于，所述嗜碱假单胞菌是从城镇污水处理厂活性污泥中筛选出来，筛选过程使用溴百里酚蓝BTB培养平板。

作为本发明的第三个方面，提供了一种嗜碱假单胞菌，其特征在于，所述嗜碱假单胞菌通过16SrDNA测序鉴定，所述嗜碱假单胞菌的16SrDNA 序列如SEQ ID NO.1所示。

作为本发明的第四个方面，提供了一种嗜碱假单胞菌的筛选培养方法，其特征在于，所述嗜碱假单胞菌由城镇污水处理厂活性污泥中筛选出菌种，筛选过程使用溴百里酚蓝BTB培养平板，筛选步骤包括：将活性污泥细菌悬液梯度稀释，涂布在BTB培养平板上，于30℃培养1～2d，挑取周围出现蓝色的单菌落，在BTB培养平板上划线纯化，使用LB培养基对筛选获得的纯化菌株进行富集培养，最终获得纯菌株。

作为本发明的第五个方面，提供了一种如上所述的嗜碱假单胞菌在污水处理领域的应用。

其中，所述嗜碱假单胞菌根据不同的硝酸盐转化场景选择碳源类型。

其中，在需要硝酸盐到亚硝酸盐的快速稳定累积时，选择以乙醇和/ 或葡萄糖为碳源的培养基；在需要生长和反硝化出现较长迟滞期，后期伴随硝酸盐浓度降低和亚硝酸盐浓度升高的场景时，选择以己酸钠和/或辛酸钠为碳源的培养基。

基于上述技术方案可知，本发明的嗜碱假单胞菌相对于现有技术至少具有如下有益效果之一：

(1)能够解决反硝化过程亚硝酸盐累积的现象；

(2)能够满足不同应用场景，通过培养过程碳源条件的不同，实现上述菌种反硝化过程中亚硝酸盐的累积。

附图说明

图1A～1C分别是本发明的菌株W-39利用不同常规碳源实现的反硝化效果曲线图，其中图1A碳源为甲醇、图1B碳源为乙醇、图1C碳源为葡萄糖；