[发明专利]一种检测PF1022A的酶联免疫试剂盒在审
申请号: | 201910227742.0 | 申请日: | 2019-03-25 |
公开(公告)号: | CN111735959A | 公开(公告)日: | 2020-10-02 |
发明(设计)人: | 董永亮;徐进;郭明;袁建栋 | 申请(专利权)人: | 重庆乾泰生物医药有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;C12N5/20;C07K16/44;C07K14/765;C07D273/00 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 pf1022a 免疫 试剂盒 | ||
本发明公开了一种检测PF1022A的酶联免疫试剂盒,本发明还公开了一种检测PF1022A的方法。本发明所提供的检测PF1022A的酶联免疫试剂盒,包括PF1022A的特异性抗体及包被原和酶标记物;所述PF1022A特异性抗体为所述PF1022A的多克隆抗体或单克隆抗体;所述包被原为PF1022A半抗原与载体蛋白的偶联物;本发明试剂盒检测PF1022A的方法,操作简便,对样品的前处理要求低,能同时快速检测大批量样品。因此,利用本发明酶联免疫试剂盒进行检测的方法,能够进行现场监控且适合大量样本的定性和定量筛查。
技术领域
本发明属于生物制药领域,具体涉及一种检测PF1022A的酶联免疫试剂盒,以及检测PF1022A的方法。
背景技术
PF1022A是新型可驱虫环缩酚酸肽,来自菌株Rosellinia的发酵代谢产物;由四个交替的N-甲基-L-亮氨酸残基和四个D-笨基乳酸或D-乳酸构成。PF1022A不仅可结合latrophilin样跨膜受体,而且还可以结合GABA受体,从而抑制寄生线虫的肌肉蠕动,抑制线虫的头部和咽部的运动。PF1022A作为驱肠虫剂广泛应用于猪、牛、羊、鸡、鸭等家畜。
随着我国畜牧业现代化、集约化和规模化生产,兽药(包括兽药添加剂)在改善动物产品品质起到十分显著的作用。但同时畜牧业中滥用兽药和超标使用兽药的现象普遍存在,动物性食品中兽药的残留严重,因此加强对动物性食品PF1022A的残留检测是非常必要的。
目前,用来检测PF1022A残留量的分析方法主要有薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、气-质联机、液-质联机等,由于复杂的仪器设备和繁琐的过程,检测成本较高,不适合现场监控和大量样品的筛查。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明提供一种检测PF1022A的酶联免疫试剂盒和一种检测PF1022A的方法,此外,本发明还提供了一种PF1022A单克隆抗体,以及PF1022A半抗原的制备方法。
首先,本发明提供了一种检测PF1022A的酶联免疫试剂盒,包括PF1022A半抗原和PF1022A的特异性抗体;所述特异性抗体为所述PF1022A的多克隆抗体或单克隆抗体;所述半抗原的结构式如下:
其中,所述PF1022A半抗原和PF1022A的特异性抗体以下述任一种形式存在:
(1)将所述PF1022A半抗原与载体蛋白进行偶联,得到PF1022A半抗原与载体蛋白的偶联物,将其作为包被原,所述特异性抗体进行酶标记后作为酶标记物;
(2)所述特异性抗体为包被原,所述PF1022A半抗原进行酶标记后作为酶标记物。
进一步的,所述试剂盒还既包括PF1022A半抗原和PF1022A的特异性抗体,还包括抗抗体;所述抗抗体为羊抗鼠抗抗体或羊抗兔抗抗体;其中,所述半抗原和抗抗体以下述任一种形式存在:
(1)将所述PF1022A半抗原与载体蛋白进行偶联,得到PF1022A半抗原与载体蛋白的偶联物,将其作为包被原,所述抗抗体进行酶标记后作为酶标记物;
(2)所述抗抗体为包被原,所述PF1022A半抗原进行酶标记后作为酶标记物。
所述PF1022A多克隆抗体或PF1022A单克隆抗体,均是以所述PF1022A半抗原与载体蛋白的偶联物作为免疫原得到的;所述载体蛋白可以为牛血清蛋白、鼠血清蛋白、人血清蛋白、兔血清蛋白或卵清蛋白等。
所述单克隆抗体是由对PF1022A的单克隆抗体杂交瘤细胞株C-72分泌产生的抗体。
所述PF1022A多克隆抗体可为鼠源、羊源、兔源或豚鼠源抗体。
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