[发明专利]一种苏木精染液及其制备方法

说明书

本发明公开了一种苏木精染液及其制备方法，所述苏木精染液按重量百分比计，包括组分：苏木精0.05％‑1％；苏木红0.05％‑1％；无水乙醇5％‑20％；硫酸铝钾1％‑10％；碘酸钠0.02％‑0.2％；一水柠檬酸0.05％‑1％；其余为水。本发明提供的苏木精染液及其制备方法，经过大量的实验后，改良了传统的苏木精染液配制方法，以达到比较理想的染色效果及使用时间，放弃了传统有剧毒氧化汞作为氧化剂及刺激性较强的冰醋酸作为抗氧化剂，降低对操作人员的职业风险并有效的保护环境，延长苏木精的使用时间，有效的降本增效。

技术领域

本发明涉及细胞染色技术领域，尤其涉及一种苏木精染液及其制备方法。

背景技术

苏木精染液为碱性染料，主要是使细胞核内的染色质和胞质内的核糖体着蓝紫色，常运用于苏木精—伊红染色法，即HE染色法(hematoxylin-eosin staining)，石蜡切片苏木精伊红染色技术是病理解剖学、组织胚胎学、法医学和生物学等领域最基本的技术操作。掌握好HE染色，也为其他染色如特殊染色、酶组化染色和免疫组化染色等技术打好基础。

一种成熟的苏木精染液是苏木精、苏木红、苏木红的活性氧化产物和非活性的超氧化产物的混合物。但是过度氧化，可导致大量非活性超氧化产物产生，这些产物是无色和无用的。因此，在配制苏木精染液时，精确地加入恰当的氧化剂和量是重要的。在实践中，苏木精染液的染色都较理想，但使用寿命不长，染液的染色力随着时间推移慢慢减弱而需重新配制。在几种氧化剂中，很多学者都首选氧化汞，而氧化汞需要在苏木精染液煮沸时加入才能放氧，当开始放氧时又要立即把染液置入冷水中终止放氧。人为因素影响较大，而汞盐也是一种毒性物质，多使用人员危害大，对环境产生污染大。而为了抑制苏木精染液中氧化剂的作用，常使用抗氧化剂，一般采用的是冰醋酸，但是冰醋酸刺激性大，挥发作用明显。

发明内容

本发明为解决现有技术中的上述问题提出了一种保持时间长、染色效果好、染色时间短的苏木精染液及其制备方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明的第一个方面提供了一种苏木精染液配方，按重量百分比计，包括如下组分：

进一步地，在所述的苏木精染液中，所述苏木精和苏木红的重量比为1:1。

进一步地，在所述的苏木精染液中，所述苏木精和一水柠檬酸的质量比为5:1。

进一步地，在所述的苏木精染液中，所述苏木精和碘酸钠的质量比为10:1。

进一步地，在所述的苏木精染液中，所述无水乙醇溶液也可用甲醇、乙二醇、异丙醇、丙二醇或丙三醇替换，也可以是一种或多种低级烷醇或多元醇的混合物。

作为本发明的第二个方面是提供一种所述的苏木精染液的制备方法，包如下步骤：

步骤1，制备试剂甲：将配方比的苏木精、无水乙醇混合，加热至50-70℃，并搅拌直至充分溶解；

步骤2，制备试剂乙：将配方比的蒸馏水与硫酸铝钾混合，并加热至45-60℃，搅拌直至充分溶解；

步骤3，将试剂甲缓慢加入试剂乙中持续搅拌并保持温度在45-55℃，使其充分反应，液体由浅棕色转为深紫色后，缓慢加入配方比的碘酸钠后，将反应液温度降至20-30℃，持续搅拌，至溶液表面出现金属色氧化膜；

步骤4，加入配方比的一水柠檬酸，搅拌至液体由深紫色转变为深紫红色；

步骤5，将上述反应液过滤后静置，即得苏木精染液。

进一步地，所述步骤1中的加热温度为55-62℃，搅拌时间为15-25分钟。

进一步地，所述步骤2中的加热温度为52-55℃，搅拌时间为10-20分钟。