[发明专利]一种用于脑胶质瘤治疗的仿生纳米载体及其制备方法

权利要求书

1.一种用于脑胶质瘤治疗的仿生纳米载体，其特征在于，所述仿生纳米载体以聚乙烯亚胺-siRNA复合物作为内核，柠康酸酐接枝聚赖氨酸作为带负电荷的中间层，且以靶向多肽修饰的细胞膜作为外壳包覆所述内核和所述中间层，所述靶向多肽为Angiopep-2。

2.一种如权利要求1所述的用于脑胶质瘤治疗的仿生纳米载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺与靶向多肽混合溶解于PBS缓冲液反应，制备得到二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-靶向多肽复合物；

取由细胞样本制备得到的细胞膜样本与所述二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-靶向多肽复合物混合孵育，得到多肽-细胞膜复合物；

将支化的聚乙烯亚胺与siRNA溶解混合孵育得到阳离子复合物，将所述阳离子复合物与柠康酸酐接枝聚赖氨酸混合并孵育，制备得到CA-siRNA三元复合物；

将所述多肽-细胞膜复合物与所述CA-siRNA三元复合物混合制备得到仿生纳米载体。

3.根据权利要求2所述的用于脑胶质瘤治疗的仿生纳米载体的制备方法，其特征在于，所述二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺与所述Angiopep-2以1:2-5的摩尔比混合。

4.根据权利要求2所述的用于脑胶质瘤治疗的仿生纳米载体的制备方法，其特征在于，所述细胞膜为红细胞膜RBCm、癌细胞膜、巨噬细胞膜和红细胞-癌细胞杂合膜中的一种，所述红细胞膜RBCm的制备包括取血样离心得到红细胞，将所述红细胞重悬于0.22×PBS-0.27×PBS缓冲液中冰浴28-35min，然后离心的产物用1×PBS缓冲液清洗，并用多孔膜挤压制备得到所述红细胞膜RBCm。

5.根据权利要求2所述的用于脑胶质瘤治疗的仿生纳米载体的制备方法，其特征在于，所述支化的聚乙烯亚胺与所述siRNA分别溶解于Hepes缓冲液，并以氮磷比为7-13：1的比例混合孵育25-35min。

6.根据权利要求2所述的用于脑胶质瘤治疗的仿生纳米载体的制备方法，其特征在于，所述柠康酸酐接枝聚赖氨酸的制备包括将聚赖氨酸溶解于PBS缓冲液中，加入柠康酸酐并调节pH至中性，室温搅拌过夜制备得到所述柠康酸酐接枝聚赖氨酸。

7.根据权利要求2所述的用于脑胶质瘤治疗的仿生纳米载体的制备方法，其特征在于，将所述阳离子复合物与所述柠康酸酐接枝聚赖氨酸混合并孵育，其中所述支化的聚乙烯亚胺的氨基的个数与所述柠康酸的羧基的个数之比为1:1-5。

8.根据权利要求2所述的用于脑胶质瘤治疗的仿生纳米载体的制备方法，其特征在于，将所述多肽-细胞膜复合物与所述CA-siRNA三元复合物进行超声混合制备得到所述仿生纳米载体，所述超声混合的时间为100-150s。

9.根据权利要求8所述的用于脑胶质瘤治疗的仿生纳米载体的制备方法，其特征在于，所述超声混合的频率为42kHz。

10.根据权利要求9所述的用于脑胶质瘤治疗的仿生纳米载体的制备方法，其特征在于，所述超声混合的功率为95-103W。