[发明专利]一种海洋细菌来源酯酶Erp3及其编码基因与应用

权利要求书

1.一种酯酶，其氨基酸序列与SEQ ID NO.2所示蛋白质序列一致。

2.一种编码权利要求1所述酯酶的多核苷酸，其与SEQ ID NO:1的核苷酸所示序列一致。

3.一种核酸构建体，其包含与一种或多种调控序列可操作地连接的权利要求2的多核苷酸，所述调控序列在合适的表达宿主中指导所述酯酶的产生。

4.一种重组表达载体，其包含权利要求3的核酸构建体。

5.根据权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于：所述的载体为原核表达载体如pET系列载体，pQE系列载体；酵母表达载体pPICZ-α-A，pHIL-D2，pPIC9，pHIL-S1；或动物细胞表达载体pSVK3、pMSG。

6.根据权利要求5所述的重组表达载体，其特征在于：所述的载体为大肠杆菌表达载体Psmt3。

7.一种宿主，其由权利要求4-6任一项所述的载体经转化或转染原核生物或真核生物宿主得到。

8.根据权利要求7所述的宿主，其为细菌、酵母或哺乳动物细胞。

9.根据权利要求8所述的宿主，其为E.coli细菌、甲醇酵母或中国仓鼠卵巢细胞。

10.根据权利要求9所述的宿主，其为E.coli细菌。

11.一种生产权利要求1所述酯酶的方法，其包括：

(a)、在有助于产生酯酶的条件下培养权利要求7所述的重组宿主细胞，其中所述宿主细胞包含SEQ ID No:1所示核苷酸；

(b)、回收所述酯酶。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于：所述方法步骤(2)中，回收方法包括离心、过滤、提取、喷雾干燥、蒸发或沉淀。

13.据权利要求12所述的方法，其特征在于：所述方法步骤(2)中，通过多种本领域已知的方法纯化，所述方法包括离子交换层析、亲和层析、疏水层析、层析聚焦层析、大小排阻层析或差示溶解度方法。

14.权利要求1所述的酯酶或权利要求7所述的能表达酯酶的宿主菌在催化C2-C10短碳链脂肪酸酯类水解中的应用，所述的C2-C10短链脂肪酸酯为具有C2-C10短碳链的对硝基苯酚酯。

15.根据权利要求14所述的应用，其特征在于，所述的C2-C10短链脂肪酸酯为对硝基苯酚乙酸酯、对硝基苯酚丁酸酯、对硝基苯酚己酸酯、对硝基苯酚辛酸酯和对硝基苯酚癸酸酯。

16.根据权利要求14-15任一项所述的应用，其特征在于，所述的酯酶催化水解温度范围为10～60℃。

17.根据权利要求16所述的应用，其特征在于，所述的酯酶催化水解温度为35℃。

18.根据权利要求14-15任一项所述的应用，其特征在于，所述的酯酶催化水解的pH值为6.0～10.0。

19.根据权利要求18所述的应用，其特征在于，所述的酯酶催化水解pH值为7.0。