[发明专利]食品和饲料中马源性成分的实时荧光PCR检测方法有效
| 申请号： | 201910231992.1 | 申请日： | 2019-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN109825602B | 公开（公告）日： | 2021-09-21 |
| 发明（设计）人： | 王强;蔡一村;宁雪;袁辰刚;潘良文 | 申请（专利权）人： | 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海华工专利事务所(普通合伙) 31104 | 代理人： | 赵孟琴;缪利明 |
| 地址： | 200135 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 食品 饲料 中马源性 成分 实时 荧光 pcr 检测 方法 | ||
1.一种食品和饲料中马源性成分的实时荧光PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
第一步，以待测样品的DNA为模板，进行荧光定量PCR扩增，获得PCR扩增产物；
第二步，检测扩增产物的荧光信号；
第三步，以检测结果的Ct值判定样品中是否含有马源性成分以及定量检测样品中的马源性成分的含量；
其中，用于PCR扩增的反应体系中含有扩增马源性成分的特异性引物对和检测马源性成分的特异性探针，所述扩增马源性成分的特异性引物对的序列如SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2所示，所述检测马源性成分的特异性探针的序列如SEQ ID NO.3所示。
2.如权利要求1所述的实时荧光PCR检测方法，其特征在于，所述PCR扩增的条件如下：
反应体系为25μL：PCR酶混合物 12.5μL，引物各10μM 1μL，探针10μM 0.5μL，DNA模板5μL，PCR级水5μL；
PCR反应条件：95℃ 10min；95℃ 15s，60℃ 60s；共45个循环。
3.一种马源性成分的检测试剂盒，其特征在于，含有以下试剂：
（a）扩增马源性成分的特异性引物对；
（b）检测马源性成分的特异性探针；
其中，所述扩增马源性成分的特异性引物对的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，所述检测马源性成分的特异性探针的序列如SEQ ID NO.3所示。
4.根据权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括：
（c）标准参照物。
5.一种如权利要求3或4所述的检测试剂盒的应用，其特征在于，所述检测试剂盒用于定性或定量检测食品或饲料中的马源性成分。
6.一种检测马源性成分的特异性引物对和探针，其特征在于，所述特异性引物对的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，所述特异性探针的序列如SEQ ID NO.3所示。
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