[发明专利]一种利用紫外诱变筛选富硒螺旋藻突变株的方法及其获得的菌株和应用

说明书

本发明涉及一种利用紫外诱变筛选富硒螺旋藻突变株的方法及其获得的菌株和应用，涉及螺旋藻的选育与筛选技术领域。本发明是利用超声波将螺旋藻破碎成单细胞或二细胞，然后在紫外诱变的条件下使之发生突变，得到耐受高浓度亚硒酸钠的螺旋藻突变株。本发明采用计数法来计算致死率，相比传统的固体平板涂布法，该方法操作简单、周期短。所得到的富硒螺旋藻突变株对硒的富集能力强，在补硒工业上有较大的应用前景。

技术领域

本发明涉及螺旋藻的选育与筛选技术领域，具体涉及一种富硒螺旋藻的制备方法，更具体地说，本发明涉及一种利用紫外诱变筛选富硒螺旋藻突变株的方法及其获得的菌株和应用。

背景技术

硒是人体必需的微量元素，位于多种抗氧化酶的活性中心，具有重要的生理功能和广泛的药理作用。螺旋藻工业化生产技术成熟，对无机硒有较强的耐受性，是对硒进行生物有机化的理想载体，因此获得拥有高富硒能力的螺旋藻对于我国的补硒工业具有十分重要的意义。

硒在人体中主要以硒蛋白形式发挥功能，如维持机体氧化还原平衡、提高免疫力、解除重金属毒性等。我国硒资源分布呈现三个鲜明特点：一是硒资源储备量巨大，总储备量占全球30％以上；二是硒资源分布极为不均，约70％的国土面积属于缺硒地区；三是缺硒人口数量庞大，占全国人口的72％。硒与人体健康密切相关，缺硒会导致克山病、大骨节病的发生。心血管疾病、糖尿病、癌症等疾病也常与缺硒相伴发生。因此合理利用硒资源以解决我国的严重缺硒现状，是当前国家亟需解决的重大问题之一。

环境中的硒多为无机硒，无机硒毒性高、人体利用率差，相对而言有机硒是安全有效的补硒形式，有机硒是指硒与蛋白质、糖类和脂质结合成的有机化合物。微藻是地球上的初级生长者，能通过光合作用将二氧化碳和水转化成有机物，螺旋藻是目前能大规模养殖的微藻之一，其生长周期短、生长速度快、硒蛋白丰富。

CN1085951公开了一种螺旋藻富硒技术，首先在低硒浓度的培养液中驯化培养，筛选出适应此种培养液的藻体，然后置于高硒浓度培养液中进行高富硒藻种的筛选，筛选出的藻株在相同硒浓度下进行连续培养，或将选出的藻株置于硒浓度为700-1000ppm培养液中，培养时间2-24h进行浓缩培养，得到富硒藻泥用清水将多余的无机硒洗掉，洗涤到PH＝7，在温度为60-80℃下烘干或喷雾干燥成为富硒藻粉。但这种方法将浓缩后的螺旋藻置于超高硒浓度(700-1000ppm)培养液中，让其在短时间(2-24h)内快速富硒。首先，700-1000ppm的硒浓度工作液，硒含量非常高，对正常的螺旋藻来说是有毒的，其次，螺旋藻将硒吸收体内并完成生物转化是一个漫长的生物学过程，难于在2h内完成，因此该发明将螺旋藻置于有毒的硒环境中短时间搅拌就制成高富硒藻粉，其富硒效果有待证实。

CN101715986A公开了一种富硒红球藻粉的制备方法及应用，其步骤：A、筛选无机硒耐受性强、硒蛋白和虾青素含量高、生长快速的雨生红球藻新品系；B、在一定温度、pH值、光照下，利用红球藻培养基进行培养；C、根据雨生红球藻品种对硒耐受性的不同，采用接种培养基中直接加无机硒或当藻细胞达到一定生物量后加入不同量的无机硒，配制高浓度含硒培养基或低浓度含硒培养基；D、藻细胞连续培养后，通过过滤或离心的方法采收，并用清水冲洗新鲜藻泥，洗去藻细胞表面的无机硒。烘干、喷雾干燥或冷冻干燥获得富硒雨生红球藻藻粉。制备的富硒雨生红球藻藻粉硒化合物含量介于10-2000μg/g，有机硒含量达到99％以上。富硒红球藻制品可在制备食品、保健食品和药品中应用。但该发明采用的雨生红球藻是单细胞真核生物，其生长条件要求更苛刻，需要在无菌条件下培养，因此产量很低，大多数企业用该藻种产虾青素；而螺旋藻是多细胞的原核生物，生长速度非常快，可在室外大规模培养。

基于上述理由，提出本申请。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用紫外诱变筛选富硒螺旋藻突变株的方法及其获得的菌株和应用。本发明通过人工驯化和紫外诱变的方法筛选到1株高富硒的螺旋藻，能高效的将无机硒转化成有机硒，这对我过补硒工业的发展具有十分重要的意义。