[发明专利]乳腺癌分型的核酸组合物、乳腺癌分型试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种乳腺癌分型的核酸组合物，其特征在于，包括多个扩增引物对及与所述多个扩增引物对对应的多种探针，各所述探针上均连接有荧光基团，所述多种探针中至少有两种探针所连接的荧光基团不同；

所述扩增引物对包括HER2引物对、ESR1引物对及PGR引物对；所述HER2引物对的序列如SEQ ID No.1～SEQ ID No.2所示；所述ESR1引物对的序列如SEQ ID No.3～SEQ ID No.4所示；所述PGR引物对的序列如SEQ ID No.5～SEQ ID No.6所示。

2.根据权利要求1所述的乳腺癌分型的核酸组合物，其特征在于，与所述HER2引物对、所述ESR1引物对及所述PGR引物对对应的探针的序列或其互补序列分别如SEQ ID No.7～SEQ ID No.9所示。

3.根据权利要求1所述的乳腺癌分型的核酸组合物，其特征在于，所述多种探针中至少有一种探针具有不同浓度。

4.根据权利要求1～3任一项所述的乳腺癌分型的核酸组合物，其特征在于，各所述探针所连接的荧光基团选自FAM、HEX、VIC、CY5及ROX中的一种。

5.根据权利要求4所述的乳腺癌分型的核酸组合物，其特征在于，与所述HER2引物对对应的探针上连接有FAM，与所述ESR1引物对对应的探针包括连接有FAM的第一探针及连接有HEX的第二探针，与所述PGR引物对应的探针上连接有HEX。

6.根据权利要求5所述的乳腺癌分型的核酸组合物，其特征在于，与所述HER2引物对对应的探针的浓度为50nM～300nM；所述第一探针的浓度为50nM～300nM，所述第二探针的浓度为50nM～300nM；与所述PGR引物对对应的探针的浓度为50nM～300nM。

7.根据权利要求1～3任一项所述的乳腺癌分型的核酸组合物，其特征在于，还包括参比引物对和与所述参比引物对对应的探针，与所述参比引物对应的探针上连接有荧光基团。

8.一种乳腺癌分型试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～7任一项所述的乳腺癌分型的核酸组合物。

9.根据权利要求8所述的乳腺癌分型试剂盒，其特征在于，还包括数字PCR预混液、液滴稳定剂、RNA提取试剂及逆转录试剂中的至少一种。

10.一种乳腺癌分型试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：

提取核酸，得到核酸样本；

将所述核酸样本、权利要求8或9所述的乳腺癌分型试剂盒中的扩增引物对和对应的探针混合后，制备PCR微反应液滴；

将所述PCR微反应液滴进行PCR扩增反应；及

收集PCR扩增反应后的产物的荧光信号，得到检测结果。