[发明专利]mmu-miR-192-5p在制备抑制胚胎着床的药物中的应用

说明书

本发明公开了一种微小RNA——mmu‑miR‑192‑5p在制备抑制胚胎着床的药物中的应用。本发明通过微小RNA表达谱微阵列实验及生物信息学方法筛选出调控子宫容受阶段并且在着床位点起关键作用的微小RNA：mmu‑miR‑192‑5p，经试验证明mmu‑miR‑192‑5p对胚胎着床有极其显著的抑制作用，提示其可作为避孕药物使用，为新药筛选提供了新的途径。

(一)技术领域

本发明涉及mmu-miR-192-5p在制备抑制胚胎着床的药物中的应用。

(二)背景技术

miR-192来源于miR-192/215家族，在机体内的脾脏、肾脏及肝脏中具有较高的表达量。miR-192被广泛报道能够参与细胞周期的调控，P53能够直接诱导miR-192的表达上调，通过靶向调控MDM2、CDC7、DHFR等基因的表达抑制细胞的增殖能力。此外，miR-192还参与由P53、TGFβ因子介导的上皮-间质转化过程，通过靶向抑制ZEB2的表达抑制癌细胞的转移和侵袭过程。近期，有研究表明，miR-192具有抗血管生成的作用，其能通过靶向抑制EGR1和HOXB9等关键转录因子全面下调血管生成的相关通路，有效抑制肿瘤发生时的血管生成过程。鉴于其阻碍肿瘤的发生和转移进程的作用，miR-192被认定为抑癌因子。但目前尚不清楚miR-192是否可以抑制胚胎着床。

通过miRBase查询比对发现，miR-192-5p在不同物种中具有保守性，人源的miR-192-5p与鼠源的miR-192-5p的一致性达到了100％，因此可以选择小鼠为模式动物，进行miR-192-5p对胚胎着床影响的研究，开发抑制或促进胚胎着床的药物。

(三)发明内容

本发明目的是提供mmu-miR-192-5p在抑制胚胎着床的药物中的应用。

本发明采用的技术方案是：

微小RNA mmu-miR-192-5p在制备抑制胚胎着床的药物中的应用。

具体的，所述mmu-miR-192-5p序列如下：

5’-CUGACCUAUGAAUUGACAGCC-3’。

优选的，所述mmu-miR-192-5p经分子修饰获得的更稳定的双链小RNA用于制备所述药物，具体的，所述分子修饰为：全部碱基甲基化修饰+5'端前3个碱基CUG和3'端前4个碱基AGCC之间进行硫代修饰+3'末端进行胆固醇修饰。与未经修饰的双链小RNA相比，修饰后的RNA与细胞膜亲和力更高，细胞转染实验转染试剂用量显著减少，特别适合动物体内干扰实验，并且在体内实验中具有更高的稳定性和抑制效果，可以采用全身注射或局部注射等多种方式给药，操作简便。

进一步，所述药物为避孕药物。

具体的，所述药物制成注射用制剂，通过注射到受体子宫达到抑制胚胎着床的作用。

本发明有益效果主要体现在：本发明提供了mmu-miR-192-5p在抑制胚胎着床的药物中的应用，经试验证明mmu-miR-192-5p对胚胎着床有极其显著的抑制作用，提示其可作为避孕药物使用，为新药筛选提供了新的途径。

(四)附图说明

图1为D1、D4、D5IMS、D5IIS子宫内膜中mmu-miR-192-5p的变化趋势；

图2为小鼠不同发情阶段的阴道涂片结果：A：发情前期；B：发情期；C：发情后期；D：间情期；

图3为qPCR法验证差异表达mmu-miR-192-5p的变化；

图4为假孕模型中mmu-miR-192-5p的变化；

图5为延时模型与延时激活模型中mmu-miR-192-5p的相对含量柱状图；