[发明专利]一种杀病原细菌的芽孢杆菌HN-2化合物及制备方法在审
申请号: | 201910239693.2 | 申请日: | 2019-03-27 |
公开(公告)号: | CN110184304A | 公开(公告)日: | 2019-08-30 |
发明(设计)人: | 靳鹏飞;谭峥;缪卫国;刘文波;王皓楠;王雨 | 申请(专利权)人: | 海南大学 |
主分类号: | C12P1/04 | 分类号: | C12P1/04;A01N63/02;A01P1/00;C12R1/07 |
代理公司: | 深圳市千纳专利代理有限公司 44218 | 代理人: | 张新蕊 |
地址: | 570228 *** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 贝莱斯芽孢杆菌 病原细菌 芽孢杆菌 制备 黄单胞菌属 保藏 黄单胞菌 耐受能力 强酸强碱 细菌病害 抑菌活性 发酵液 生防菌 叶枯唑 紫外线 菌株 潜能 生长 防治 开发 研究 | ||
1.一种杀病原细菌的芽孢杆菌HN-2化合物,其特征在于:该类化合物是从贝莱斯芽孢杆菌HN-2中提取得到的,所述的贝莱斯芽孢杆菌HN-2其保藏编号为CCTCC NO:M2018382。
2.如权利要求1所述的一种杀病原细菌的芽孢杆菌HN-2化合物,其特征在于:从贝莱斯芽孢杆菌HN-2中提取化合物所用的试剂为正丁醇、盐酸和/或硫酸铵。
3.一种如权利要求1或2所述的杀病原细菌的芽孢杆菌HN-2化合物的制备方法,其特征在于,其步骤包括:
(1)将保存的生防菌菌株HN-2活化培养,得到发酵液;发酵液离心去除菌体,保留上清液即无菌体发酵液;
(2)无菌体发酵液加入正丁醇萃取,取上层正丁醇层,去除正丁醇即得。
4.如权利要求3所述的一种杀病原细菌的芽孢杆菌HN-2化合物的制备方法,其特征在于:所述的步骤(2)中,无菌体发酵液与加入的正丁醇的体积比为1:1。
5.如权利要求1或2所述的一种杀病原细菌的芽孢杆菌HN-2化合物的制备方法,其特征在于,其步骤包括:
(1)将保存的生防菌菌株HN-2活化培养,得到发酵液;发酵液离心去除菌体,保留上清液即得无菌体发酵液;
(2)无菌体发酵液加入盐酸滴定至PH值为2,密封后冷藏,之后离心,弃去上清液,得到沉淀即可。
6.如权利要求5所述的一种杀病原细菌的芽孢杆菌HN-2化合物的制备方法,其特征在于:所述的步骤(2)中,滴定所用的盐酸的摩尔浓度为2mol/L;冷藏的条件为4℃冷藏12小时,离心时控制转速10000转/分钟,离心10分钟。
7.如权利要求1或2所述的一种杀病原细菌的芽孢杆菌HN-2化合物的制备方法,其特征在于,其步骤包括:
(1)将保存的生防菌菌株HN-2活化培养,得到发酵液;发酵液离心去除菌体,保留上清液即无菌体发酵液;
(2)无菌体发酵液加入硫酸铵粉末,静置后,离心,弃去上清液,得到沉淀即可。
8.如权利要求7所述的一种杀病原细菌的芽孢杆菌HN-2化合物的制备方法,其特征在于:所述的步骤(2)中,4℃静置12小时。
9.如权利要求1或2所述的一种杀病原细菌的芽孢杆菌HN-2化合物的制备方法,其特征在于:所述的生防菌菌株HN-2发酵液的制备方法为:将保存的生防菌菌株HN-2接种于LB培养基上28℃活化培养,培养2天,挑取适量生防菌HN-2加入到液体的LB培养基中,摇床28℃,180转每分钟摇菌48小时,即得发酵液。
10.如权利要求9所述的一种杀病原细菌的芽孢杆菌HN-2化合物的制备方法,其特征在于:发酵液离心条件为:10000转每分钟离心10分钟。
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