[发明专利]mmu-miR-335-3p在制备抑制胚胎着床的药物中的应用

说明书

本发明公开了一种微小RNA——mmu‑miR‑335‑3p在制备抑制胚胎着床的药物中的应用。本发明通过微小RNA表达谱微阵列实验及生物信息学方法筛选出调控子宫容受阶段并且在着床位点起关键作用的微小RNA：mmu‑miR‑335‑3p，经试验证明mmu‑miR‑335‑3p对胚胎着床有极其显著的抑制作用，提示其可作为避孕药物使用，为新药筛选提供了新的途径。

(一)技术领域

本发明涉及mmu-miR-335-3p在制备抑制胚胎着床的药物中的应用。

(二)背景技术

MicroRNA是一种长度在22nt左右的内源性非编码短链RNA分子，能够靶向裂解mRNA或抑制翻译过程等方式在转录后水平调控基因的表达。MiRNA具有较高的同源性，广泛存在于动植物体内，参与多种生物生长、发育、分化、疾病防御等进程的调控，其在不同生理状态下的特异性表达更使其有望成为检测特定生理过程的分子标记物。此外，miRNA能够被多种细胞以不同形式选择性分泌到微环境当中，作为一种介质参与细胞间的交流对话。

miR-335是哺乳动物常见的miRNA之一，存在于多种细胞和组织中。研究证实，骨肉瘤、肺癌、胃癌等恶性肿瘤组织中miR-335低表达，并导致其靶基因调控异常，进而为恶性肿瘤细胞增殖、分化提供有利条件。研究显示，miR-335在胃癌细胞中低表达，上调miR-335表达可有效抑制胃癌细胞侵袭及转移能力，提示miR-335可能发挥抑制癌基因功能。但是miR-335在星形细胞瘤中呈高表达，并且促进细胞的增殖以及侵袭，发挥着类似癌基因的功能，上述研究结果说明miR-335在不同肿瘤组织中发挥着不同的作用。而在胚胎着床过程中，也发生迁移、分化、增殖、微血管形成等生理过程，子宫内膜上皮细胞与胚胎之间会进行相互侵入，细胞增殖分化，胚胎滋养层侵入子宫内膜上皮，微血管生成。虽然已经证实了miR-335在肿瘤细胞的迁移、分化、增殖、微血管形成中的作用，但尚无文献证实其在胚胎着床过程中的作用。通过miRBase查询比对发现，miR-335-3p在不同物种中具有保守性，人源的miR-335-3p与鼠源的miR-335-3p的一致性达到了100％，因此可以选择小鼠为模式动物，进行miR-335-3p对胚胎着床影响的研究，开发抑制或促进胚胎着床的药物。

(三)发明内容

本发明目的是提供mmu-miR-335-3p在抑制胚胎着床的药物中的应用。

本发明采用的技术方案是：

微小RNA mmu-miR-335-3p在制备抑制胚胎着床的药物中的应用。

具体的，所述mmu-miR-335-3p序列如下：5’-UUUUUCAUUAUUGC UCCUGACC-3’。

优选的，所述mmu-miR-335-3p经分子修饰获得的更稳定的双链小RNA用于制备所述药物，具体的，所述分子修饰为：全部碱基甲基化修饰+5'端前3个碱基UUU和3'端前4个碱基GACC之间进行硫代修饰+3'末端进行胆固醇修饰。与未经修饰的双链小RNA相比，修饰后的RNA与细胞膜亲和力更高，细胞转染实验转染试剂用量显著减少，特别适合动物体内干扰实验，并且在体内实验中具有更高的稳定性和抑制效果，可以采用全身注射或局部注射等多种方式给药，操作简便。

进一步，所述药物为避孕药物。

具体的，所述药物制成注射用制剂，通过注射到受体子宫达到抑制胚胎着床的作用。

本发明有益效果主要体现在：本发明提供了mmu-miR-335-3p在抑制胚胎着床的药物中的应用，经试验证明mmu-miR-335-3p对胚胎着床有极其显著的抑制作用，提示其可作为避孕药物使用，为新药筛选提供了新的途径。

(四)附图说明

图1为D1、D4、D5IMS、D5IIS子宫内膜中mmu-miR-335-3p的变化趋势；