[发明专利]一种用于延缓培养的间充质干细胞衰老的药物及培养方法

说明书

本发明公开了一种用于延缓培养的间充质干细胞衰老的药物及培养方法，属于细胞培养技术领域，本发明使用的氯氮平稀释液在延缓间充质干细胞衰老的过程中更简便安全和高效，且成本低廉。

技术领域

本发明属于细胞培养技术领域，尤其涉及一种用于延缓培养的间充质干细胞衰老的药物及培养方法。

背景技术

间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)具有较强的自我更新和多向分化潜能，在组织工程和再生医学领域中已得到广泛应用。目前，经过广泛的研究，MSC可向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经细胞等分化，其具备广阔的再生医学应用前景。

为了得到足够数量MSCs以用于临床治疗，MSCs需要在体外大量扩增，然而干细胞在传代培养增殖过程中不可避免的发生复制性衰老现象。为了减缓培养过程中产生的MSC衰老，更好地维持干细胞特性，世界范围内的科研团队对此进行了广泛的探索。目前，主要通过调节生长因子、抗氧化剂、营养素的浓度及氧含量等方法延缓细胞培养过程中的衰老，从而促进MSCs的增殖。Ito等证实成纤维细胞生长因子2通过降低P21、P53、P16基因的表达水平，其可以减缓人MSCs长期培养过程中出现的复制性衰老。褪黑素(N-acetyl-5-methoxy-tryptamine)通过清除自由基，其可保护细胞核、线粒体、DNA免受氧化应激损伤，因此褪黑素也具备抗衰老的潜能。此外，组蛋白去乙酰酶抑制剂、西罗莫司、单细胞海藻提取物等也被证明能够减缓人脐带MSC的衰老。

如果MSC在培养过程中的衰老可以减缓，则MSCs在再生医学与组织工程领域的应用前景将会更加广阔，这将会造福成千上万的患者。另外，对于MSC培养过程中减缓衰老的探索，寻觅安全而有效的方法对其早期干预，对人体衰老的延缓衰同样具有重要的借鉴意义。

目前用于延缓MSCs衰老的试剂存在一些不足：1)成本高昂，如生长因子、营养素；2)成分不稳定，常常含有不同类型的杂质，对于临床级MSC而言，这会带来一系列不可预知的风险，如单细胞海藻提取物。

氯氮平在临床上面广泛用于失眠、抑郁症、癫痫等疾病的控制，其仅是一种代表性的非典型抗精神病药物，与其他抗精神病药物相比具有较好的疗效。目前，对氯氮平的研究主要集中于神经系统疾病方面的疗效及相关作用机制。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术存在的不足，而提供一种用于延缓培养的间充质干细胞衰老的药物及培养方法，本发明可安全和重复性地实现间充质干细胞衰老的延缓，其成本低廉、过程简单可靠。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种用于延缓间充质干细胞衰老的药物，其包含氯氮平。

作为上述技术方案的改进，所述药物是通过以下方法进行制备：氯氮平先溶解于乙醇中，再用细胞培养基稀释，制备成氯氮平稀释液；所述药物即为氯氮平稀释液，所述氯氮平稀释液中氯氮平的浓度为12.5～50μg/mL。

作为上述技术方案的改进，所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞。

作为上述技术方案的改进，所述药物还包含药学上可接受的辅料。

另外，本发明还提供一种用于延缓间充质干细胞衰老的培养方法，其包括以下步骤：氯氮平先溶解于乙醇中，再用细胞培养基稀释，制备成氯氮平稀释液，所述氯氮平稀释液再添加到间充质干细胞的细胞培养基中。

作为上述技术方案的改进，所述氯氮平稀释液中氯氮平的浓度为12.5～50μg/mL。

作为上述技术方案的改进，间充质干细胞的细胞培养基中氯氮平的浓度为12.5～50μg/mL。

作为上述技术方案的改进，所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞。