[发明专利]一种葡聚糖与离子液体混合式3D凝胶、制备方法及其应用方法

权利要求书

1.一种葡聚糖与离子液体混合式3D凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤S1、制备氨基酸离子液体和经过修饰的葡聚糖大分子的初步混合液态产物；

步骤S2、在所述步骤S1中的初步混合液态产物中添加含有巯基的接枝分子和细胞悬液，得到凝胶前体溶液；

步骤S3、在所述步骤S2中的凝胶前体溶液中加入交联分子，得到葡聚糖与离子液体混合式3D凝胶。

2.根据权利要求1所述的一种葡聚糖与离子液体混合式3D凝胶的制备方法，其特征在于，所述步骤S1具体包括如下步骤：

步骤S11、取出于-80℃温度条件冷冻而呈固态的蒸馏水和碳酸盐缓冲液，并在室温下融解为液态，得到液态蒸馏水和液态碳酸盐缓冲液，再取出于-80℃温度条件冷冻而呈固态的葡萄糖马来酰亚胺聚合物，每170μL固态的葡萄糖马来酰亚胺聚合物加所述液态蒸馏水175μL进行溶解，溶解时通过漩涡振荡器进行振荡，得到葡萄糖马来酰亚胺聚合物溶液；

步骤S12、将所述步骤S11中的得到的液态蒸馏水、碳酸盐缓冲液、葡萄糖马来酰亚胺聚合物混合溶液以及离子液体于离心管中混匀，得到初步混合液态产物。

3.根据权利要求1所述的一种葡聚糖与离子液体混合式3D凝胶的制备方法，其特征在于，所述步骤S2具体包括如下步骤：

步骤S21、取出于-20℃或-80℃温度条件下含有巯基的RGD肽链固态物质，加入液态蒸馏水进行溶解，溶解时通过漩涡振荡器进行振荡，得到浓度为20mmol/L的含巯基RGD肽链水溶液；

步骤S22、在所述步骤S1中的初步混合液态产物中添加所述步骤S21得到的含巯基RGD肽链水溶液，吹打混匀后，室温静置3-5分钟，然后加入细胞悬液，得到凝胶前体溶液，所述细胞悬液为培养基细胞悬液，且可含细胞也可不含细胞。

4.根据权利要求1所述的一种葡聚糖与离子液体混合式3D凝胶的制备方法，其特征在于，所述步骤S3具体包括如下步骤：

步骤S31，取出于-80℃温度条件冷冻而呈固态的聚乙二醇寡肽混合物交联剂，每200μL固态的聚乙二醇寡肽混合物交联剂加蒸馏水188μL进行溶解，溶解时通过漩涡振荡器进行振荡，得到聚乙二醇寡肽混合物交联剂溶液，再将所述聚乙二醇寡肽混合物交联剂溶液滴加到细胞培养板上；

步骤S32、取所述步骤S2得到的凝胶前体溶液与步骤S31中细胞培养板上的含有巯基的聚乙二醇寡肽交联剂混合，快速吹打2-3次后静置3-5分钟，得到交联后的导电凝胶；

步骤S33、将所述步骤S32得到的交联后的导电凝胶，加培养基至完全覆盖凝胶后，再盖上细胞培养板盖子，放入培养箱中孵育；

步骤S34、2h后更换所述步骤S33中的培养基，得到葡聚糖与离子液体混合式3D凝胶。

5.基于权利要求1-4任一项所述的一种葡聚糖与离子液体混合式3D凝胶的制备方法所制备的一种葡聚糖与离子液体混合式3D凝胶，其特征在于，多个块状的所述葡聚糖与离子液体混合式3D凝胶排布形成的凝胶块阵列存在狭缝以及凝胶之间的结合界面，所述结合界面形式为多个凝胶微块贴合或不贴合形成的几何界面。

6.基于权利要求5所述的一种葡聚糖与离子液体混合式3D凝胶的应用方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤S4、制备经过修饰的葡聚糖大分子与蒸馏水和碳酸盐缓冲液的初步混合液态产物，在所述初步混合液态产物中添加含有巯基的接枝分子和细胞悬液，得到凝胶前体溶液，在所述凝胶前体溶液中加入交联分子，得到不含离子液体的葡聚糖3D凝胶，标记为第三凝胶块；

步骤S5、取两块所述葡聚糖与离子液体混合式3D凝胶，分别标记为第一凝胶块和第二凝胶块，将所述步骤S4的第三凝胶块覆盖于第一凝胶块和第二凝胶块之上，且所述第三凝胶块浸没于第一凝胶块和第二凝胶块之间的沟道中并发生交联，得到凝胶块组；

步骤S6、将所述步骤S5中的凝胶块组应用于培养细胞组织；

所述第一凝胶块和第二凝胶块不含细胞，所述第三凝胶块包裹细胞且机械刚度小于第一凝胶块和第二凝胶块。