[发明专利]一种生防菌株TMN-1及生防菌剂的制备方法和应用

说明书

本发明涉及植物保护技术领域，尤其涉及一种生防菌株TMN‑1及生防菌剂的制备方法和应用。本发明的生防菌株TMN‑1为肉座菌属真菌，含有生防菌株TMN‑1的生防菌剂的制备为取烟草种植地区青枯病发病地块健康烟株根际土，采用稀释涂布平板法在孟加拉红选择性培养基上筛选出生防菌株TMN‑1，将筛选出的生防菌株TMN‑1在PDA培养基上进行活化，得到的纯生防菌株TMN‑1在PD培养基中于180rpm、28℃振荡培养5天，于7000rpm离心8‑10min，用无菌水调节孢子浓度为1×10⁸cfu/mL。本发明的生防菌剂应用于烟草种植中，能够促进烟草健康生长，且还能够改善土壤微生物群落结构，对烟草青枯病具有良好防治效果，能够减轻烟草青枯病的危害。

技术领域

本发明涉及植物保护技术领域，尤其涉及一种生防菌株TMN-1及生防菌剂的制备方法和应用。

背景技术

烟草青枯病又称为烟瘟，是由青枯雷尔氏菌引起的一种土传性细菌病害，也是一种典型的维管束病害，最显著的发病症状是枯萎，一旦发病可造成烟草全株死亡，是烟草的毁灭性病害之一，严重影响烟叶的产量。1864年在印度尼西亚首次报道了青枯菌对烟草的毁灭性危害。青枯病目前在我国烟草种植地区发生广泛，河南、四川、重庆、贵州、云南等烤烟种植区域每年均有发生，且随着连作年限的增加，连作障碍无法打破，导致土壤酸化加重，土壤肥力下降，土壤健康失去原有的平衡，作物不能将康生长，自身抵抗病害能力下降，加之土壤病原不断累积，导致了烟草青枯病的爆发

目前为止，烟草青枯病的防治目前无有效手段或药剂，化学防治为主要防治方法，但会带来严重的环境问题；培育抗性品种是比较好的解决办法，但我国地域广，青枯病小种分化较多，变异迅速，抗性品种会快速的失去抗病性，并非长久之计。所以，如何寻求改良土壤，重塑土壤根际微生物生态群落结构，重新建立失去的土壤平衡，同时保证植株自身健康，提升植株自身抵抗病害能力的产品，是目前亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供一种生防菌株TMN-1和生防菌剂的制备方法，制备得到的生防菌株TMN-1应用于烟草种植中，能够促进烟草健康生长，且还能够改善土壤微生物群落结构，对烟草青枯病具有良好防治效果，能够减轻烟草青枯病的危害。

本发明通过以下技术手段解决上述技术问题：

本发明的目的是提供了一种生防菌株TMN-1，所述生防菌株TMN-1为肉座菌属真菌，为哈茨木霉的有性型，已于2019年03月01日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.17188。

分析生防菌株TMN-1生物学特性，生防菌株TMN-1兼具促进植物健康生长且对烟草青枯病具有良好的防治效果，其能够改善土壤微生物群落结构，减轻烟草青枯病的危害。

所述生防菌株TMN-1中含有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

本发明的另外一个目的在于提供一种生防菌剂，所述生防菌剂中含有上述的生防菌株TMN-1。

本发明的另外一个目的在于提供一种生防菌剂的制备方法，所述制备方法如下：

取烟草种植地区青枯病发病地块健康烟株根际土，采用稀释涂布平板法在孟加拉红选择性培养基上筛选出生防菌株TMN-1，将筛选出的生防菌株TMN-1在PDA培养基上进行活化，得到的纯生防菌株TMN-1在PD培养基中于180rpm、28℃振荡培养5天，于7000rpm离心8-10min，用无菌水调节孢子浓度为1×108cfu/mL，得到生防菌剂。

进一步，所述孟加红选择性培养基包括以下重量份的原料：马铃薯200.0份、无水葡萄糖20.0份、琼脂20.0份、蛋白胨5.0份、硫酸镁0.5份、磷酸二氢钾1.0份、孟加拉红0.033份、氯霉素0.4份、蒸馏水1000份。