[发明专利]降低OSBPL2基因表达的siRNA、重组载体及其应用

说明书

本发明属于分子生物学和基因工程技术领域，涉及一种降低OSBPL2基因表达的siRNA、重组载体及其应用。具体地，涉及一种siRNA，所述siRNA特异性地降低OSBPL2基因表达。由于本发明提供的siRNA能够特异性地降低OSBPL2基因表达，使得该siRNA可应用于制备治疗和/或预防乳腺癌的药物。

技术领域

本发明属于分子生物学和基因工程技术领域，更具体地，涉及一种降低OSBPL2基因表达的siRNA、所述siRNA对应的shRNA，编码所述shRNA的DNA，包括该DNA的重组载体，包括该重组载体的重组慢病毒，包括所述siRNA、shRNA、编码shRNA的DNA、重组载体和重组慢病毒的宿主细胞，以及它们的应用。

背景技术

乳腺癌是世界范围内女性常见的恶性肿瘤之一，其新发率和死亡率位居各类癌症首位。尽管我国乳腺癌发病率相对较低，但人口基数大，总体发病人数多，发病率有逐年上升的趋势，且发病年龄呈年轻化趋势。乳腺癌在细胞起源、组织学形态、疾病分级、临床表现、治疗反应以及转移潜能等方面都表现出极大的复杂性与异质性，限制了现有乳腺癌治疗方法的有效性和广泛性。临床上仍然缺乏乳腺癌治疗的靶点。

氧甾醇结合蛋白2(Oxysterol Binding Protein Like 2,OSBPL2)编码基因位于20q13.33，具有18个外显子。OSBPL2蛋白分布于细胞质和细胞核。OSBPL2为氧甾醇结合蛋白家族成员之一，该家族是一类细胞内脂质受体。OSBPL2可结合磷脂、磷酸、磷脂酰肌醇3-磷酸以及25-羟基胆固醇。目前研究表明OSBPL2基因与听力丧失相关。对于OSBPL2基因与乳腺癌的关系未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供针对降低OSBPL2基因表达的siRNA，所述siRNA对应的shRNA，编码所述shRNA的DNA，包括该DNA的重组载体，包括该重组载体的重组慢病毒，包括所述siRNA、shRNA、编码shRNA的DNA、重组载体和重组慢病毒的宿主细胞，以及它们的应用。

为了实现上述目的，本发明的第一方面提供一种siRNA，所述siRNA特异性地降低OSBPL2基因表达。

本发明的重点在于提供新的乳腺癌治疗靶标，而不限于具体的siRNA序列，可以根据本领域常规的各种方法设计针对该靶标的siRNA。所述siRNA通常具有19～27bp的核苷酸序列。

具体地，所述siRNA的核苷酸序列至少包括以下一组核苷酸序列：

(1)第一组核苷酸序列

所述第一组核苷酸序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，所述SEQ ID NO:1为5'-GAGCUGCUCAAACAUAAUGAA-3'，所述SEQ ID NO:2为5'-UUCAUUAUGUUUGAGCAGCUC-3'；

(2)第二组核苷酸序列

所述第二组核苷酸序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示，所述SEQ ID NO:3为5'-CACUUUAAACCGUGUGGAUUA-3'，所述SEQ ID NO:4为5'-UAAUCCACACGGUUUAAAGUG-3'；

(3)第三组核苷酸序列

所述第三组核苷酸序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示，所述SEQ ID NO:5为5'-GGGCAAAAGCGUGGAGGCGGA-3'，所述SEQ ID NO:6为5'-UCCGCCUCCACGCUUUUGCCC-3'。

本发明第二方面提供一种shRNA，其为具有茎环结构的单链RNA，所述shRNA的核苷酸序列至少包括以下一组核苷酸序列：

(1)第五组核苷酸序列