[发明专利]一种抗原固定化基质膜及包含其的用于检测自身免疫疾病相关抗核抗体谱的试剂盒及其用途

权利要求书

1.一种抗原固定化基质膜，其特征在于，包含但不仅包含以下22条彼此独立的抗原检测线，所述的抗原检测线由双链DNA、组蛋白、核糖体P0蛋白、PCNA、SmD1、SmD3、SmB/B’、snRNP-A、snRNP-C、snRNP68/70、SSA/Ro60、SSA/Ro52、SSB/La、Jo-1、PL-7、PL-12、PmScl、Scl-70、CENP-A、CENP-B、RA33以及PR3组成。

2.如权利要求1所述的抗原固定化基质膜，其特征在于，所述抗原固定化基质膜为硝酸纤维膜或尼龙膜；所述抗原检测线平行设置；

和/或，所述组蛋白、所述核糖体P0蛋白、所述snRNP68/70、所述PCNA、所述SmD1、所述SmD3、所述SmB/B’、所述snRNP-A、所述snRNP-C、所述SSA/Ro52、所述SSB/La、所述Jo-1、所述PL-7、所述PL-12、所述Scl-70、所述CENP-A、所述CENP-B、所述SSA/Ro60、所述PmScl-75、所述RA33及所述PR3是利用哺乳动物细胞系统表达获得，所述哺乳动物细胞为HEK293细胞。

3.一种检测自身免疫疾病相关抗核抗体谱的试剂盒，其特征在于，其包括如权利要求1或2所述的抗原固定化基质膜。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的抗原固定化基质膜为免疫印迹法用抗原固定化基质膜；较佳地，所述的试剂盒还包括用于固定所述抗原固定化基质膜的支撑载体、酶联试剂、显色底物、样本稀释液、浓缩洗涤液和反应终止液，所述支撑载体与所述抗原固定化基质膜组成反应膜条。

5.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，抗原固定化基质膜上还包被有三条质控带：浓度为35-50μg/ml的高浓度质控带、浓度为15-30μg/ml的中浓度质控带以及浓度为0.5-10μg/ml的低浓度质控带，较佳地，所述质控带由纯化后的人源IgG划线而成；

和/或，所述抗原固定化基质膜上还包被有阴性对照。

6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述阴性对照为已剥除IgG的人类血清。

7.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述抗原固定化基质膜上还包被有反应起始线，所述的反应起始线较佳地为辣根过氧化物酶。

8.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述酶联试剂为辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG；

所述显色底物为5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐与四唑硝基蓝底物组合(BCIP/NBT)或3,3',5,5'-四甲基联苯胺；

所述样本稀释液为含有10％BSA的1×TBST缓冲液；

所述浓缩洗涤液为20×TBST缓冲液；

和/或，所述反应终止液为0.1M/L硫酸。

9.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的自身免疫疾病为弥散性结缔组织病，所述的弥散性结缔组织病较佳地为系统性红斑狼疮、干燥综合征、混合型结缔组织病、皮肌炎/多肌炎、系统性硬化症、局限性硬皮病、风湿性关节炎和韦格纳肉芽肿中的一种或多种；

和/或，所述的试剂盒还带有反应孵育盘，所述反应孵育盘为具有独立半封闭凹槽的塑料孵育盘；所述的独立半封闭凹槽的数量较佳地为10个。

10.一种如权利要求1或2所述的抗原固定化基质膜，或者如权利要求3～9任一项所述的试剂盒在检测自身免疫疾病中的用途；所述的自身免疫疾病优选为弥散性结缔组织病，所述的弥散性结缔组织病优选为系统性红斑狼疮、干燥综合征、混合型结缔组织病、皮肌炎/多肌炎、系统性硬化症、局限性硬皮病、风湿性关节炎和韦格纳肉芽肿中的一种或多种。