[发明专利]一种抗BCMA的单域抗体及其应用

说明书

本发明涉及本发明涉及一种抗BCMA的单域抗体，其包含CDR1、CDR2、CDR3以及框架区序列；其中，所述CDR1序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.4所示；所述CDR2序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.5所示；所述CDR3序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.6所示。本发明还涉及上述抗BCMA的单域抗体的相关应用及其制备方法。本发明所述的抗BCMA单域抗体B1和B65与抗原具有优异的亲和能力，且仅能与BCMA结合，与其它抗原(CD38，CD138等)均不能结合，其对BCMA具有良好的特异性，其单域抗体B1、B65能够有效结合BCMA阳性靶细胞，对于治疗与BCMA的表达相关的疾病或病症的药物提供了理论基础，尤其是适用于多发性骨髓瘤的治疗。

技术领域

本发明涉及胞免疫治疗技术领域，尤其涉及一种抗BCMA的单域抗体及其应用。

背景技术

多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一种无法治愈的恶性肿瘤，其特点是患者骨髓中浆细胞恶性增生。当前主要使用蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂等来缓解多发性骨髓瘤的症状，但是均不能清除肿瘤。当前一些研究通过靶向CD138、CD38、CS-1、BCMA的疗法来治疗MM。有研究验证了通过靶向CD38分子可以有效杀伤骨髓瘤细胞；靶向CD38的抗体Daratumumab已被FDA批准用于多发骨髓瘤的治疗。但是由于其导致白细胞减少等比较严重的不良反应限制了其应用。

B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen，BCMA)是一种表达在浆细胞，浆母细胞和骨髓浆细胞的抗原，其不在B细胞或者造血干细胞上表达。这种有限的表达细胞类型，使得BCMA可能作为治疗MM的靶点，以开发单抗、抗体偶联药物、双特异性抗体、CAR-T等疗法。当前还没有靶向BCMA的药物上市，但是有少数通过抗体偶联药物，CAR-T疗法等来通过靶向BCMA以治疗多发性骨髓瘤的疗法在进行临床试验，其临床疗效尚为未知数。

重链抗体主要存在于骆驼或者羊驼等动物体内，其抗体结构简单，仅包含重链可变区，不包含轻链。进一步的，其重链可变区被称为单域抗体或者是纳米抗体。相较于普通的抗体结构，单域抗体具有分子小，结构更简单，稳定性高，易表达等特点。并且其与人源抗体VH3的序列高度同源，其同源性远超过鼠源单克隆抗体。基于以上优点，近年来对于纳米抗体的研究以及在疾病诊断和治疗中的应用取得长足的发展。尤其是2019年2月FDA批准了用于治疗成人获得性血栓性血小板减少性紫癜(aTTP)的单域抗体药物Caplacizumab上市，是全球首个上市的单域抗体药物。因此，开发新的靶向BCMA的单域抗体对于多发性骨髓瘤的治疗具有重要意义。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明提供一种能够特异性靶向BCMA的单域抗体。本发明使用纯化的BCMA-FC抗原免疫羊驼，得到BCMA的多克隆抗体，并筛选出特异性VHH片段，构建羊驼噬菌体展示文库；采用靶分子BCMA对噬菌体文库进行陶选，并对陶选后的文库进行扩增及噬菌粒救援，对筛选出的BCMA单域抗体进行序列比对和进化树分析，从而获得能够特异性靶向BCMA的单域抗体。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一个目的是一种抗BCMA的单域抗体，所述单域抗体序列包含CDR1、CDR2、CDR3以及框架区序列；其中，所述CDR1序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.4所示；所述CDR2序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.5所示；所述CDR3序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.6所示。

进一步地，所述单域抗体为B1抗体或B65抗体，所述B1抗体的序列如SEQ ID NO.7所示，所述B65抗体的序列如SEQ ID NO.8所示。

本发明的第二个目的是提供一种用于编码上述抗BCMA的单域抗体的核酸。