[发明专利]银杏GbBBX25基因及其表达蛋白和应用

说明书

本申请公开了一种银杏GbBBX25基因及其表达蛋白和应用，该银杏GbBBX25基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示。本申请从银杏中分离得到GbBBX25基因，编码了273个氨基酸的819bp开放阅读框(ORF)，包含两个b‑box结构域，但没有CCT结构域。GbBBX25定位于细胞核，具有转录因子重要的核定位特征。GbBBX25转录本主要在叶片中表达量最高，盐胁迫下诱导效果显著。GbBBX25在山新杨中过量表达，证实了在盐胁迫条件下，转基因杨树的可溶性糖、总蛋白含量和过氧化物酶(POD)活性均高于非转基因杨树，表明GbBBX25可以通过提高抗氧化系统的效率来提高耐盐性。GbBBX25在转基因杨树中过量表达可以提高植株的耐盐性，提高GbBBX25基因的表达水平可用于育种中来面对非生物胁迫，具有很好的实用性。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种银杏GbBBX25基因及其表达蛋白和应用。

背景技术

植物已进化出了一种复杂的网络，它以高度复杂的机制应对不稳定的非生物和生物的条件。干旱、高盐、低温等非生物胁迫是影响植物生长发育的重要因素，在育种工作中，不仅需培育高产、优质的优良品种，而且还要培育出适应多种逆境的高抗品种。锌指蛋白在调控植物生长发育和应对逆境过程中发挥着重要作用。B-box(BBX)蛋白质是锌指转录因子或转录调节因子，其中包含一个或两个B-box。1995年，在拟南芥中发现了第一个B-box蛋白(CO)。2009年，在拟南芥中发现了32个具有N端B-box结构域的蛋白，统一命名为BBX1-32。根据B-box域的数量和序列特征以及蛋白质是否包含CCT域，分为5个结构组。结构组I有6个成员(CO，也称为BBX1到6)，每一个都包含两个b-box域和一个CCT域。第II组有7个成员(BBX7到13)，结构类似于I组，但在第二个b-box域有差异。结构组III有4个成员(BBX14到17)，其特征是只有一个b-box域和一个CCT域。BBX2到17都是共同的(COL)蛋白质。结构组IV有8个成员(BBX18到25)，其中包含两个b-box框域，但没有CCT域。最后，结构组V有7个成员(BBX26到32)，每个成员只有一个b-box域。

BBX蛋白在响应光、昼夜节律信号和油菜素类固醇的光串扰信号中起转录调节作用有研究表明BBX蛋白可以促进非生物应激反应。据报道，AtBBX24的过量表达被认为是提高了耐盐性。CmBBX24在菊花中的过量表达，提高了植物对低温和干旱的耐受水平。同时，AtBBX18通过控制一组热休克反应基因，参与热耐受。尽管取得了这些进展，BBX结构域在DNA结合中的确切生化作用及生物学功能仍在很大程度上不清楚。

银杏是一种生态经济树种，具有食品、医药、木材、景观和科研等价值-。银杏叶中含有丰富的活性成分，特别是黄酮类和萜内酯类化合物，能促进血液循环，抑制血栓形成。目前，由于其药用价值，它是世界上最受欢迎的功能性植物之一。银杏是银杏纲唯一存活的树种，可追溯到1.7亿年前侏罗纪时期。地质记录表明，银杏形态发生了微小的变化，表明其对环境变化的适应性强，对恶劣环境的耐受性强。

迄今为止，BBX基因已在一些物种中有报道，包括藻类、蕨类、针叶、单子叶和双子叶植物。但尚未有关于银杏BBX锌指类蛋白的功能研究。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种银杏GbBBX25基因，满足耐盐使用需求。本发明的另一目的是提供一种上述银杏GbBBX25基因的表达蛋白。本发明还有一目的是提供一种上述银杏GbBBX25基因的应用。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

银杏GbBBX25基因，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。

所述的银杏GbBBX25基因的表达蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

含有所述的银杏GbBBX25基因的载体或宿主菌。