[发明专利]一种禽滑液囊支原体的聚合酶螺旋扩增检测引物组和试剂盒

权利要求书

1.用于检测禽滑液囊支原体的聚合酶螺旋扩增引物组，其特征在于：所述引物组由以下引物组成：

上游引物S1：acgaattcgtacatagaagtatag-GTGATCAAACTCCRGACCTGC；

下游引物S2：gatatgaagatacatgcttaagca-ACCTGGGTTTTCTGGGTTTCCT。

2.一种禽滑液囊支原体的聚合酶螺旋扩增检测试剂，其特征在于：所述试剂包括权利要求1所述的引物组。

3.根据权利要求2所述的试剂，其特征在于：所述试剂还包括如下组分：10×反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、Bst DNA聚合酶、去离子水、模板DNA和显色试剂。

4.根据权利要求3所述的试剂，其特征在于：所述试剂中Mg²⁺的浓度为6mM。

5.根据权利要求3所述的试剂，其特征在于：所述试剂中dNTPs的浓度为1.5mM；作为优选，所述试剂中显色试剂为0.025mM酚红和0.08mM甲酚红混合指示剂。

6.根据权利要求3所述的试剂，其特征在于：所述试剂还包括阳性对照。

7.一种禽滑液囊支原体的聚合酶螺旋扩增检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括权利要求2-6任一项所述的聚合酶螺旋扩增检测试剂。

8.权利要求2-6任一项所述的检测试剂或权利要求7所述的检测试剂盒在如下任一中的应用：

(1)不以疾病的诊断和治疗为目的的检测或辅助检测禽滑液囊支原体；

(2)制备用于检测或辅助检测禽滑液囊支原体的产品；

(3)不以疾病的诊断和治疗为目的的检测或辅助检测待测动物样品是否感染禽滑液囊支原体；

(4)制备用于检测或辅助检测待测动物样品是否感染禽滑液囊支原体的产品；

(5)不以疾病的诊断和治疗为目的的检测待测病毒是否为禽滑液囊支原体；

(6)制备用于检测或辅助检测待测病毒是否为禽滑液囊支原体的产品。

9.一种检测或辅助检测待测动物样品是否感染禽滑液囊支原体的方法，该方法不以疾病的诊断和治疗为目的，其特征在于：包括以下步骤：

(1)从待测动物样品中提取基因组DNA作为模板，采用权利要求2-6任一项所述的检测试剂或权利要求7所述的检测试剂盒进行聚合酶螺旋扩增，得到扩增产物；作为优选，所述聚合酶螺旋扩增的反应条件为恒温63℃作用40min；

(2)按照下述任一方法确定待测动物样品是否感染禽滑液囊支原体：

A、扩增产物呈现橙黄色则待测动物样品感染禽滑液囊支原体；扩增产物呈现紫红色则待测动物样品未感染禽滑液囊支原体；

B、将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，电泳条带呈梯状分布，则待测动物样品感染禽滑液囊支原体；仅有一条引物条带，则待测动物样品未感染禽滑液囊支原体。

10.一种检测或辅助检测待测病原为禽滑液囊支原体的方法，该方法不以疾病的诊断和治疗为目的，其特征在于：包括以下步骤：

(1)从待测材料中提取基因组DNA作为模板，采用权利要求2-6任一项所述的检测试剂或权利要求7所述的检测试剂盒进行聚合酶螺旋扩增，得到扩增产物；作为优选，所述聚合酶螺旋扩增的反应条件为恒温63℃作用40min；

(2)按照下述任一方法确定待测病原是否为禽滑液囊支原体：

A、扩增产物呈现橙黄色则待测病原是禽滑液囊支原体；扩增产物呈现紫红色则待测病原不是禽滑液囊支原体；

B、将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，电泳条带呈梯状分布，则待测动物病原是禽滑液囊支原体；仅有一条引物条带，则待测病原不是禽滑液囊支原体。