[发明专利]乌头生物碱及炮制水解产物的应用

说明书

本发明提供乌头生物碱及炮制水解产物在制备抗炎药物和抗癌药物中的应用。本发明的乌头生物碱及炮制水解产物对类风湿关节炎和卵巢癌有良好的治疗效果。

技术领域

本发明涉及乌头生物碱及炮制水解产物的应用，具体来说，涉及准噶尔乌头碱、乌头碱或苯甲酰乌头原碱在制备抗炎药物和抗癌药物中的应用。

背景技术

本研究拟采用细胞生物实验筛选准噶尔乌头生物碱及炮制水解产物中抗类风湿活性成分，人类风湿成纤维样滑膜细胞为人的炎性细胞更具有代表性。故体外采用CCK8实验验证乌头碱，准噶尔乌头碱，炮制水解产物苯甲酰乌头原碱对人类风湿成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)细胞株的增殖抑制作用；ELISA方法检测不同药物组对HFLS-RA细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α及PG-E2含量影响；采用RT-PCR和Western blot技术分别检测不同药物组对HIF-1α、VEGFA、及TLR4mRNA和蛋白相对表达水平筛选成分的抗类风湿活性。

体外抗肿瘤活性研究采用CCK-8法检测不同浓度准噶尔乌头生物碱及炮制水解产物作用不同时间后A549人肺癌细胞、PANC-1人胰腺癌细胞、SKOV-3人卵巢癌细胞的增殖情况，筛选出抗肿瘤有效的准噶尔乌头单体；采用Transwell小室模型研究有效单体对肿瘤细胞侵袭和迁移能力。体内抗肿瘤活性研究采用裸鼠异体移植瘤模型，通过肿瘤体积、抑瘤率观察有效单体的体内抗肿瘤活性；采用小动物活体成像，采集荧光信号，考察有效单体在小鼠体内的靶向性。小动物活体成像技术可以在同一个体反复多次获得一系列数据，消除个体差异，操作简便、检测快速、可以动态观察实验结果、灵敏度高，在考察药物在动物体内靶向性方面可以弥补常规需要处死动物、缺乏直观性、操作复杂等的缺点，能够非侵入式地检测活体内特异的生物学行为，最大限度地模拟人，本发明正式实验通过体内研究选用BALB/c-nu裸鼠又称为无胸腺裸鼠，因此缺乏免疫反应，是免疫缺陷动物，BALB/c-nu裸鼠是一种广泛使用的实验小鼠并且BALB/c-nu裸鼠对致癌物极其敏感，常用于实验动物模型的建立，在癌症治疗和免疫学中广泛应用。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了准噶尔乌头生物碱及炮制水解产物的应用。

本发明提供乌头生物碱及炮制水解产物在制备抗炎药物中的应用。

作为优选，所述炎症为类风湿关节炎。

作为优选，所述乌头生物碱及炮制水解产物为准噶尔乌头碱、乌头碱或苯甲酰乌头原碱。

作为优选，所述准噶尔乌头碱的浓度为350μg/ml；所述苯甲酰乌头原碱的浓度为1000μg/ml；所述乌头碱的浓度为500μg/ml。

本发明提供乌头生物碱及炮制水解产物在制备抗癌药物中的应用。

作为优选，所述癌为卵巢癌。

作为优选，所述乌头生物碱及炮制水解产物为准噶尔乌头碱或苯甲酰乌头原碱。

作为优选，所述准噶尔乌头碱的用量为0.01-0.04g/kg，所述苯甲酰乌头原碱的用量为0.01-0.04g/kg。

本发明的乌头生物碱及炮制水解产物对类风湿关节炎和卵巢癌有良好的治疗效果。

附图说明

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1为HFLS-RA细胞生长曲线图。

图2为不同浓度单体药物对HFLS-RA细胞的作用效果。

图3为不同浓度准噶尔乌头碱对HFLS-RA细胞干预不同时间后的作用效果。