[发明专利]一种从微生物发酵得到的毛油中制备PUFAs甘油酯的方法

说明书

本发明涉及脂肪酸的生物分离及酶催化技术领域，具体涉及一种从微生物发酵得到的毛油中，制备高纯度PUFAs甘油酯的方法，包括以下步骤：（1）将发酵制得的毛油通过酶法水解得到游离的脂肪酸；（2）利用酶法富集与分子蒸馏耦合富集得到高纯度的PUFAs；（3）将步骤（2）得到的PUFAs与甘油在脂肪酶的催化下进行酯化反应得到高纯度的PUFAs甘油酯。以上步骤均以海泡石为过滤剂，通过从微生物发酵得到的毛油，最终制得高纯度的PUFAs甘油酯，其中，PUFAs甘油三酯含量≥84%。本发明创造性的提供了一种从微生物发酵得到的毛油中，通过绿色高效的酶法水解和耦合富集得到高纯度的PUFAs，再通过脂肪酶催化酯化制备高纯度PUFAs甘油酯，解决了目前只能获得PUFAs乙酯的技术问题。

技术领域

本发明涉及一种从微生物发酵得到的毛油中，制备PUFAs甘油酯，经由藻油水解，耦合富集多不饱和脂肪酸，酯化反应生成PUFAs甘油酯的方法。

背景技术

多不饱和脂肪酸（PUFAs）对人体健康，预防疾病有着重大的作用，其中，二十二碳六烯酸（cis-4, 7, 10, 13, 16, 19-Docosahexaenoic Acid，DHA）和二十碳二五烯酸（Docosapentaenoic acid，DPA）由于在人体自身无法合成而成为必需脂肪酸，在人体中具有十分重要的生理学意义，提取、分离作为药品和高级营养品的高纯度DHA和DPA制剂已成为开发和研究的当下热点。一方面，DHA是一种对人体重要的多不饱和脂肪酸，具有健脑益智、促进神经核视觉系统发育、抗癌、抗炎、预防和治疗心血管疾病和延缓衰老等功效，在医药、食品、饲料等行业具有广阔的应用前景；另一方面，DPA是人体中许多组织的重要组成部分，包括心脏、大脑、肝脏、血红细胞和脂肪组织，其具有抗癌的功效，对胃癌等多种癌症都具有预防功能。

传统的PUFA的来源主要是深海鱼油，例如中国专利CN101161819A和CN101348807A都公开了利用鱼油n-3PUFA浓缩物和甘油通过酯化反应富集DHA和EPA，上述两个专利均以鱼油为原料。但是，由于食物链的富集作用导致提取的鱼油中含有许多有毒有害物质，如二恶英（Dioxin）、毒杀芬等，人类在海洋中排放的重金属元素也会在海鱼的体内积累，大大影响了PUFAs的品质。微生物发酵得到藻油与鱼油相比，是从培养的藻类中直接提取，不经食物链的富集，不含任何色素和重金属离子，安全无污染，且为可再生资源，更重要的是其脂肪酸组成较为简单，微藻油安全无污染，且DHA和DPA的含量通常较鱼油高。因此以藻油为多不饱和脂肪酸的来源是安全清洁可靠的。

从微生物发酵得到的藻油中，制备PUFAs甘油酯，必须先富集得到高纯度的PUFAs。由发酵得到的藻油富集PUFAs，传统工艺中都是以精炼的藻油为初始原料，精油是由毛油通过脱胶、脱酸、脱色、脱溴等工段获得。例如中国专利CN104394702B，用于不断富集由微藻产生的、具有DHA乙酯的一种油的方法。藻油精炼过程，必须使用大量的强酸强碱以及有机溶剂，并且工段复杂耗时，这样使得成本过高。因此，本发明创造性的以毛油为原料，利用脂肪酶水解酶的选择专一性直接水解，过程简单，水解率极高，一方面，水解获得游离的脂肪酸，另一方面，达到了脱胶、脱酸、脱色效果，同时，通过多级分子蒸馏富集达到脱溴效果。直接以毛油为初始原料，省去了藻油的精炼工段，过程简单，环境友好，成本低。